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Connecting the OptiGrid®
191    PerkinElmer          
3. Connect the other end of the BNC-RF cable to the OPTIGRID
®
port on the rear of the Acquisition 
Hub.  
Note: this cable will fit if connected the wrong way around, but the OptiGrid
®
will only work if the cable 
is connected in the orientation shown below.
4. If you have a field stop (field diaphragm) installed in you microscope, remove it from the field stop 
port.  Install your OptiGrid
®
in the field stop port. Your OptiGrid
®
“In” position can be found by 
pushing the OptiGrid
®
into the field stop port until the “clickstop” engages. In this position the 
OptiGrid
®
should be visible in the ocular lenses or with the camera when fluorescence images are 
observed. The “Out” position can be found by withdrawing the OptiGrid
®
from the field stop port 
(disengaging the “clickstop”) until the grid is no longer in the light path, and no elements of the grid 
housing are in the light path. In this position the OptiGrid
®
can be left in the field stop port. 
5.  Switch on the Acquisition Hub and the OptiGrid
®
controller box. The USB, PWR and RDY lights 
on the Acquisition Hub and the red light on the front of the OptiGrid
®
controller should all be 
illuminated. 
NOTE: If the LEDs on the Acquisition Hub or OptiGrid
®
controller fail to illuminate, check the cabling 
and make sure that none of the connecting pins are bent.
6. You must now set up the OptiGrid
®
for use with Volocity. This requires you to set up the device 
preferences in Volocity and calibrate the OptiGrid
®
Setting Volocity Preferences
1. Open the Volocity application.
2. Select Preferences... from the Edit menu (Windows) or the Volocity menu (Macintosh).
3. Click on the Devices icon in the left-hand panel. A list of devices that have been correctly 
connected to your computer will appear in the right-hand panel. Each device has a subset of 
device controls that are listed beneath the device. 
Motorized Focus OptiGrid
®
Models
1. Scroll through the list of devices until you find the Qioptiq OptiGrid
®
Controller. 
2. Check the box next to the Qioptiq OptiGrid
®
Controller, check the boxes for all of its associated 
devices.
Change page order pdf - re-order PDF pages in C#.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Support Customizing Page Order of PDF Document in C# Project
how to reorder pages in pdf online; how to change page order in pdf acrobat
Change page order pdf - VB.NET PDF Page Move Library: re-order PDF pages in vb.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Sort PDF Document Pages Using VB.NET Demo Code
pdf change page order; how to rearrange pages in a pdf document
Volocity Acquisition Installation and Reference
September 2011  192
Manual Focus OptiGrid
®
Models 
1. Scroll through the list of devices until you find the Improvision Acquisition Hub. 
2. Check the box next to the Improvision Acquisition Hub, check the box next to the Grid 
Calibrator.
Calibrating the OptiGrid
®
It is important to focus the grid manually the first time that you calibrate. The information in this section 
applies to all OptiGrid
®
models.
In order to calibrate the OptiGrid
®
you must have a uniformly fluorescent sample against which the 
grid can be imaged. Sealing a small amount of fluorescent ink between a slide and a cover slip can 
make an ideal calibration slide. Highlighter pens are an excellent source of such ink.  Alternatively, 
you can use the Qioptiq calibration slide.
Calibration process
1. Open Volocity and select Show Video Preview from the Window menu.
2. Mount the calibration slide on the microscope and select an appropriate fluorescence filter. For 
example, blue excitation and green emission works well with yellow ink.
3. Expose the calibration slide to the fluorescent light source. Calibration can be done with any lens 
but you will get better grid contrast with low power lenses.  
4. Use the microscope focus drive to focus on the fluorescent material. Air bubbles or the edge of the 
“inked” area make good reference points. 
VB.NET Word: Change Word Page Order & Sort Word Document Pages
Note: if you are trying to change the order of a you want to see other VB.NET Word document editing controls, please read this Word reading page which has
rearrange pdf pages; how to move pages in pdf
C# Word - Process Word Document in C#
various Word document processing implementations using C# demo codes, such as add or delete Word document page, change Word document pages order, merge or
pdf page order reverse; pdf reorder pages online
Calibrating the OptiGrid®
193    PerkinElmer          
5. Move to a field of view that is uniformly filled with fluorescent material.
6. Move the OptiGrid
®
to the “in” position in the microscope’s fieldstop location.
7. Adjust the aperture diaphragm on the microscope to improve the contrast if necessary.
8. Direct all light to your camera and, if your camera supports it, select Auto-Exposure from the 
Video Preview controls (or the AE button).
Note: If the exposure is low (<20ms), you may see grid lines in your grid confocal images due to lamp 
flicker. Avoid low exposures by reducing lamp intensity or using neutral density filters. 
9. Use the grid focus control to adjust the position of the OptiGrid
®
until the image of the grid is 
maximally focused against the fluorescent material on the Video Preview. 
NOTE: With manual focus model of the OptiGrid
®
you must use the “hex wrench” focusing tool to 
focus the grid. Insert the hex wrench in the middle of the three holes visible on the side of the 
OptiGrid
®
until it engages. Twisting the hex wrench tool changes the focal position of the OptiGrid
®
 
Avoid using excessive force when focusing the OptiGrid
®
as you can damage the grid focus 
mechanism when the grid has reached the limit of its movement. If resistance is met you are likely to 
have reached the focus limit and should twist the hex wrench tool in the opposite direction.
It is important that the focus is consistent across the grid,
C# PDF File & Page Process Library SDK for C#.net, ASP.NET, MVC
Jpeg to PDF; Merge PDF Files; Split PDF Document; Remove Password from PDF; Change PDF Permission Settings. C# File: Split PDF; C# Page: Insert PDF pages; C#
move pages in pdf document; reverse pdf page order online
C# PowerPoint - Sort PowerPoint Pages Order in C#.NET
control, developers can swap or adjust the order of all or several PowerPoint document pages, or just change the position of certain one PowerPoint page in an
reorder pdf pages; pdf reverse page order
Volocity Acquisition Installation and Reference
September 2011  194
10. Select Calibrate Confocal Grid... from the Video menu. A progress bar is displayed as the 
OptiGrid
®
is calibrated; this may take several minutes.
The calibration of the grid is now complete and the calibration slide can be removed and replaced with 
the specimen that you wish to image.
you can use the Qioptiq calibration slide.
OptiGrid
®
Installation and Calibration Troubleshooting 
During calibration, you require an image where the focus is consistent across the grid.
If you are unable to focus your grid against your calibration slide, despite moving the grid through its 
full focus range, check the manufacturer of you fluorescence filter set. Filters manufactured by 
Semrock do not work with the OptiGrid
®
and should be avoided.
you can use the Qioptiq calibration slide.
Insufficient contrast warning or error 13901 during calibration (all models)
These errors indicate that the grid is not consistently in focus or that the grid contrast is not high 
enough for imaging. 
To rectify this, follow these steps:
1. Ensure that the grid paddle is in the light path.
C# Word - Sort Word Pages Order in C#.NET
library control, developers can swap or adjust the order of all or several Word document pages, or just change the position of certain one Word page in an
how to reorder pdf pages; reorder pages in a pdf
VB.NET PDF File & Page Process Library SDK for vb.net, ASP.NET
VB.NET PDF - How to Modify PDF Document Page in VB.NET. VB.NET Guide for Processing PDF Document Page and Sorting PDF Pages Order.
change page order in pdf online; how to reorder pages in pdf file
Calibrating the OptiGrid®
195    PerkinElmer          
2. Turn off “Auto Contrast” if your camera supports this function. “Auto Contrast” can lead you to 
believe that grid contrast is better than it actually is.
3. Use the microscope focus drive to focus on the calibration slide.
4. Adjust the focus of the OptiGrid
®
, using the Grid Focus Control (motorized focus OptiGrid
®
) or the 
hex wrench tool (manually focusing OptiGrid
®
). 
It is important that the focus is consistent across the grid; use the focus adjustment to position the 
grid such that contrast is as consistent as possible.
5. Repeat steps 2 and 3 to maximize the grid contrast. It can help to use the numerical readout of the 
minimum and maximum pixel values in the “Video Preview” window to do this.
6. Closing the aperture diaphragm will improve grid contrast.
ɸ
Reducing the excitation light intensity and increasing the camera exposure time may 
improve contrast.
ɸ
Different objectives may give better contrast. Calibration is best performed with a good-
quality Plan-Apochromat air objective.
you can use the Qioptiq calibration slide.
Grid does not move during calibration (all models)
During calibration the grid should move, first slowly in one direction, then more quickly in different 
directions.  If the grid does not move or the calibration fails with error 13902, follow these steps.
Motorized Focus OptiGrid
®
Models
1. Switch off the OptiGrid
®
controller. The OptiGrid
®
controller must be switched off while connecting 
and disconnecting cables because it has a high-voltage output.  
2. Check that the cables are connected correctly. The OptiGrid
®
paddle should be connected to the 
OptiGrid
®
controller via two cables; one to the Hi Voltage Output connector and the other to the 
MOTOR connector on the OptiGrid
®
controller. The host computer should be connected to the 
OptiGrid
®
controller via a USB cable to the USB connector.
3. Check both ends of the high-voltage cable and make sure that no pins are bent on the connectors. 
If a pin is bent, carefully bend it back into position with a small screwdriver.
Manual Focus OptiGrid
®
Models
1. Switch off the OptiGrid
®
controller and the Acquisition Hub. The OptiGrid
®
controller must be 
switched off while connecting and disconnecting cables as it has a high-voltage output.
2. Check cables are connected correctly. The OptiGrid
®
paddle (or microscope connection) should 
be connected to the “hi volt” output of the black OptiGrid
®
controller. The “input” on the OptiGrid
®
controller should be connected to the “OptiGrid
®
” port on the Acquisition Hub with the blue cable. 
Note that the blue cable is not a standard BNC-BNC cable; it is a BNC-RF cable. A standard BNC-
BNC cable may physically fit, but will not work.
3. Check that no pins are bent on the high-voltage output of the OptiGrid® controller. There should 
be four pins, two in the OptiGrid
®
controller socket and two in the grey paddle cable. If a pin is 
bent, carefully bend it back into position with a small screwdriver.
There are four pins, two on each side of the connector
4. Check that no pins are bent on the low-voltage input of the OptiGrid
®
controller. There should be 
two pins, one in the blue cable and one in the OptiGrid
®
controller socket. If a pin is bent, carefully 
bend it back into position with a small screwdriver.
There are pins on both sides of the connector
5. Check that the pin is not bent at the Acquisition Hub end of the blue BNC-RF cable.
C# TIFF: How to Reorder, Rearrange & Sort TIFF Pages Using C# Code
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how to move pages around in pdf; reorder pdf pages reader
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On this page, we will illustrate how to protect PDF document via Change PDF original password. In order to run the sample code, the following steps would be
change page order pdf; how to reorder pages in pdf reader
Volocity Acquisition Installation and Reference
September 2011  196
6. Check that the “OptiGrid
®
” socket on the Acquisition Hub is not damaged – it is possible for the 
central part of the socket to get distorted if the pin in the blue cable is not central. If the socket is 
damaged, it is normally possible to repair it using a pin to tease the metal parts of the socket back 
into place.
This OptiGrid
®
socket has been slightly damaged and the metal parts teased back into place.  
Compare with the Piezo Z socket on the left.
7. Switch on both the Acquisition Hub and OptiGrid
®
controller. The USB, PWR and RDY lights on 
the Acquisition Hub and the red light on the front of the OptiGrid
®
controller should all be 
illuminated. 
8. Retry calibration. If calibration fails again, contact Technical Support or the dealer that supplied 
your OptiGrid
®
.
you can use the Qioptiq calibration slide.
Using the OptiGrid
®
Once you have calibrated the OptiGrid
®
, you are ready to use it for acquisition.  If you intend to 
acquire multi-channel image sequences you may need to ensure that the grid is correctly focused for 
each of your excitation wavelengths. The worked examples in this section illustrate this process.  
Grid controls
All versions of the OptiGrid
®
have the grid mode controls. The focus and auto-focus controls are not 
available with manual focus models of the OptiGrid
®
.
Auto focus
ɸ
Click Grid AF to allow Volocity to auto focus the grid for you. Volocity will test a number of 
grid focus positions until it finds the position in which grid confocal images with the best 
contrast are generated. Auto focus will only work after your grid has been calibrated for the 
first time and provided you have a specimen mounted and in focus.
Focus
ɸ
Use this control to adjust the focus position of the grid.  You can use this control as an 
alternative to Grid AF, or to fine tune the result of Grid AF. 
grid modes
focus
auto-focus
Using the OptiGrid®
197    PerkinElmer          
Grid modes
There are three grid mode controls. From left to right:
ɸ
Grid Off: Switches the grid off. There is a stationary grid pattern on the Video Preview and 
from the ocular lenses of the microscope.
Volocity Acquisition Installation and Reference
September 2011  198
ɸ
Grid Confocal: Activates the grid. There is a confocal image on the Video Preview and a 
moving grid pattern from the ocular lenses of the microscope.
ɸ
Grid Wide Field: Activates the grid. There is a wide field image (without grid lines) on the 
Video Preview and a moving grid pattern from the ocular lenses of the microscope.
Using the OptiGrid®
199    PerkinElmer          
Single-channel grid confocal images
1. Open Volocity and select Show Video Preview from the Window menu.
2. Mount your specimen slide on the microscope stage and select an appropriate fluorescence filter 
set.
3. Expose the specimen slide to the light source and select a suitably powered lens.  
4. Move to the field of view that interests you.
5. Ensure that the OptiGrid
®
is in the “in” position in the microscope’s fieldstop location.
6. Direct all light to your camera and, if your camera supports it, select Auto-Exposure from the Video 
Preview controls (or the AE button).
7. Set the Grid activation control in the Video Preview to Off. You should see clear horizontal lines 
superimposed on your specimen.
8. Click Grid AF to focus the OptiGrid
®
automatically. Alternatively, use the grid Focus control to 
focus the OptiGrid
®
Volocity Acquisition Installation and Reference
September 2011  200
NOTE: With the manual focus model of the OptiGrid
®
you must use the “hex wrench” focusing tool to 
focus the grid. Insert the hex wrench in the middle of the three holes visible on the side of the 
OptiGrid
®
until it engages. Twisting the hex wrench tool changes the focal position of the OptiGrid
®
Avoid using excessive force when focusing the OptiGrid® as you can damage the grid focus 
mechanism when the grid has reached the limit of its movement. If resistance is met, you are likely to 
have reached the focus limit and should twist the hex wrench tool in the opposite direction.
Note: You can also adjust the grid position whilst the grid is in “Grid Confocal” mode. As you move the 
grid, the signal-to-noise ratio of the grid confocal image will improve if the grid’s focus is improved. 
1. Set the Grid activation control to “Grid Confocal”.
2. Change the slide or mount the slide in the first place.
3. You are now ready to acquire grid confocal images or image sequences.
4. After acquisition, remember to move the OptiGrid
®
out of the microscope’s light path or ensure 
that the shutter is closed. If a light source is left on with the grid inserted but not moving, a grid 
image can be burnt into fixed samples which will cause gridlines.
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