mvc view to pdf itextsharp : How to add text to a pdf in reader Library SDK API .net wpf windows sharepoint 92015006323-part1594

ITSP 6.0
Ref. No.-ITS/444/09 
Date/Time of Receipt- 
(For Official Use) 
Application for 
the Innovation and Technology Fund 
Innovation and Technology Support Programme 
- Tier 3 - 
Development of a Vitamin-C Surgical Irrigation Solution to 
Improve Healing Outcomes of Surgical Repair of Tendon and 
Ligament Injuries 
Submitted by
The Chinese University of Hong Kong 
Appendix IV
How to add text to a pdf in reader - insert text into PDF content in C#.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
XDoc.PDF for .NET, providing C# demo code for inserting text to PDF file
how to insert text in pdf file; adding text to pdf in preview
How to add text to a pdf in reader - VB.NET PDF insert text library: insert text into PDF content in vb.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Providing Demo Code for Adding and Inserting Text to PDF File Page in VB.NET Program
add text to pdf using preview; add text field to pdf
ITSP 6.0
Page 1 of 25 
Section A 
Basic Information
(When an application is approved, the information in this section will be published at the ITF website (denoted with #) 
and/or carried forward as pre-filled data in the related progress/final reports.) 
1. Project Title# 
1.1.  English (not more than 20 words): 
Development of a Vitamin-C Surgical Irrigation Solution to Improve Healing Outcomes of 
Surgical Repair of Tendon and Ligament Injuries 
1.2.  Chinese (not more than 30 words): 
開發維س素C 沖洗液以促進肌腱及韌൅損傷的術後癒合
2.  Abstract# 
(Please provide a brief summary of the objectives, R&D methodology and the impacts and benefits of the project.) 
2.1.  English (not more than 200 words): 
Tendon and ligament injuries are very common sporting and occupational injuries. Surgical 
repair provides a mechanically stable micro-environment for the tendons or ligaments to 
heal, but the healing outcomes are always compromised by the low innate healing capacity. 
Thus it is important to study potential treatments to promote the innate healing capacity. 
We discovered that surgical irrigation with vitamin C solution may be able to improve 
healing in animal models. Conventional surgical irrigation solution only acts as neutral fluid 
to cleanse the surgical sites. Limited modifications of surgical irrigation solution have been 
proposed to reduce infection or bleeding, but there is no investigation to develop irrigation 
solution with an added value to improve healing outcomes. We propose to develop a new 
formula of vitamin C supplemented surgical irrigation solution which can promote tendon 
and ligament healing. Pre-clinical studies in well-established animal models will be used to 
evaluate the effects of the new irrigation solution, and the results will be used to apply for 
patents. In the next stage of the product development, clinical trials could be conducted 
with industrial collaboration.      
2.2.  Chinese (not more than 300 words): 
肌腱及韌൅損傷是十分ൄ見的運動創傷和職業性勞損Ζ手術修復雖然為肌腱及韌൅損傷提供
了穩定的癒合微環境,但癒合成效往往受制於自身癒合能力不足Ζ故此,促進自身癒合能力
便成為改善療效的重要課題Ζ我們發現利ش維س素 C沖洗肌腱創口有可能促進癒合Ζ一般沖
洗液僅為沖洗創口的中性液體;一些經改良的沖洗液配方能減少流血或感染風險,但是能夠
促進癒合的沖洗液則屬創新意念Ζ有見及此,我們建議研發一種嶄新的維س素C 沖洗液以促
進肌腱及韌൅損傷的術後癒合Ζ我們利ش經多年驗證的動物模型,去收集有關維س素 C沖洗
液在促進肌腱及韌൅癒合方面的實驗數據,作為申請專利註冊的基礎Ζ我們將於下一步進行
臨床測試,並與工業界共同開發有關產品Ζ      
3.  Objectives 
(Please state in clear and specific terms the technological challenges and what the proposal aims to achieve.)
1.  To develop a value-added surgical irrigation solution with Vitamin C supplementation in 
order to improve healing outcomes of tendon and ligament surgeries 
2.  To evaluate the effects of vitamin C supplemented solution in animal models of tendon and 
ligament injuries 
3.  To apply for patent on the formula of vitamin C supplemented solution and its application on 
tendon and ligament surgeries      
4.  R&D Methodology   
Appendix IV
C# PDF insert image Library: insert images into PDF in C#.net, ASP
inserting image to PDF in preview without adobe PDF reader installed. Insert images into PDF form field. How to insert and add image, picture, digital photo
add text pdf professional; adding text fields to pdf acrobat
VB.NET PDF Text Extract Library: extract text content from PDF
With this advanced PDF Add-On, developers are able to extract target text content from source PDF document and save extracted text to other file formats
how to insert a text box in pdf; add text box in pdf
ITSP 6.0
Page 2 of 25 
(Please  provide  a  brief  description  of  the  technology  to be  developed  and/or  the  innovative use of  existing 
technologies.  Details should be provided in Section C.)
In this project, we will develop a new value-added surgical irrigation solution with vitamin C 
(L-ascorbic acid) supplementation. Basically, surgical irrigation solution should be isotonic, 
non-viscous, non-toxic and non-antigenic. Vitamin C in the form of sodium L-ascorbate enjoys a 
very high safety profile and high solubility, which make it possible to constitute isotonic solution 
(290-310 mOsm/L) for surgical irrigation. Since the reduced form of L-ascorbate confers most 
of its biochemical activities, auto-oxidation of vitamin C into dihydroascorbate may entail a loss 
in bioactivities. In the first stage, we’ll formulate the vitamin C irrigation solution in 3 different 
doses at physiological osmolarity and pH, and test the product stability with respect to pH and 
ascorbate concentration under different storage conditions (i.e. temperature). In the second 
stage, the effects of vitamin C irrigation solution on tendon and ligament healing will be 
assessed in our well-established rat models of patellar tendon injury and anterior cruciate 
ligament (ACL) reconstruction respectively. As a well-known antioxidant, we have previously 
shown that vitamin C supplementation reduced the extent of oxidative stress in injured tendons. 
We speculate that modulation of post-surgical oxidative stress may be beneficial to tendon and 
ligament healing by promoting neovascularization and alleviating the extent of inflammation. 
The early effects of the vitamin C irrigation solution will be evaluated by histological 
examination of inflammatory infiltration, measurement of serum C-reactive protein 
(CRP)/interleukin-6 (IL-6) and 3-D Doppler ultrasound imaging for neovascularization; while the 
final healing outcomes will be assessed by histology, mechanical test and gait analysis. In the 
third stage, we shall patent the vitamin C irrigation solution in the US patent office and the 
China patent office based on our pre-clinical experimental data.      
5.  Deliverables# 
(Please set out the deliverables, itemized as appropriate, together with their detailed technical specifications, of the 
project.) 
5.1.  English 
1.  Pre-clinical evidences for the effectiveness of Vitamin C-supplemented surgical 
irrigation solution to optimize healing outcomes for tendon and ligament surgeries. 
2.  Patents for the application of Vitamin C supplemented irrigation solution in tendon and 
ligament surgeries to be filed in the patent offices in US and PRC.      
5.2.  Chinese 
1.  收集有關維س素C 沖洗液能促進肌腱及韌൅術後癒合的臨床前實驗證據 
2.  有關維س素C 沖洗液ش於肌腱及韌൅修復手術的專利註冊(美國Ε中國) 
6.  Dissemination Plan 
(Please provide a brief description of the activities that would be undertaken to promote the project deliverables to 
the target users.  Details should be provided in Section C.)
Since collection of pre-clinical data and application of patent are the primary goals of this 
project, the results could not be disclosed until the patents are filed. When the patents are filed, 
we plan to commercialize the prototype of vitamin C irrigation solution in the following steps: 
1.  Disclose our findings by submitting reports to International conferences and/or 
peer-reviewed journal. 
2.  Promotion of the patented technology (vitamin C irrigation solution) by printing a pamphlet to 
be distributed in the Hong Kong Med Fair 2011. 
3.  With the patents and plan for clinical trial, we shall contact the local and international 
manufacturers of surgical irrigation solution to seek for industrial collaboration for production 
and marketing.      
Appendix IV
VB.NET PDF insert image library: insert images into PDF in vb.net
try with this sample VB.NET code to add an image As String = Program.RootPath + "\\" 1.pdf" Dim doc New PDFDocument(inputFilePath) ' Get a text manager from
how to add text to a pdf in acrobat; how to insert text box on pdf
C# PDF Text Extract Library: extract text content from PDF file in
How to C#: Extract Text Content from PDF File. Add necessary references: RasterEdge.Imaging.Basic.dll. RasterEdge.Imaging.Basic.Codec.dll.
add text boxes to pdf; adding text to a pdf in acrobat
ITSP 6.0
Page 3 of 25 
Section B 
Implementation Schedule
(When an application is approved, the information in this section will be published at the ITF website (denoted with #) 
and/or carried forward as pre-filled data in the related progress/final reports.) 
1.  Overall Schedule# 
(When planning the project commencement date, please consider that it may take of a few months to approve an 
application.) 
Commencement date (dd/mm/yyyy) 
1/9/2010 
Completion date (dd/mm/yyyy) 
31/8/2011 
Project duration (month) 
12 
2.  Project Milestones# 
(Please set out individual milestones to be achieved at different stages of implementation.  Detailed account should 
be provided Section C.) 
Per iod 
Milestones 
From 
(dd/mm/yyyy) 
To  
(dd/mm/yyyy) 
1/9/2010 
15/10/2010 
Formulation of vitamin C irrigation solution and test for basic 
properties and stability 
16/10/2010 
15/2/2011 
Investigation of efficacy of different dosages of Vitamin C 
irrigation solution in rat model of patellar tendon injury 
16/2/2011 
15/6/2011 
Investigation of efficacy of different dosages of Vitamin C 
irrigation solution in rat model of ACL reconstruction 
1/4/2011 
31/8/2011 
Data analysis and applying patents in PRC/US 
1/7/2011 
31/8/2011 
Preparation for final report of the project and submissions to 
international conferences and peer-reviewed journals 
Appendix IV
VB.NET PDF Password Library: add, remove, edit PDF file password
VB: Add Password to PDF with Permission Settings Applied. This VB.NET example shows how to add PDF file password with access permission setting.
how to insert text into a pdf with acrobat; adding text pdf
C# PDF Password Library: add, remove, edit PDF file password in C#
C# Sample Code: Add Password to PDF with Permission Settings Applied in C#.NET. This example shows how to add PDF file password with access permission setting.
adding text to a pdf document acrobat; how to input text in a pdf
ITSP 6.0
Page 4 of 25 
Section C 
Project Details
1.   Background 
1.1.  General background leading to this project. Please provide supporting documents, 
such as published papers by members of the project team or other researchers. 
Musculoskeletal disorders are leading cause of disability around the world, accounting for 25% of total 
cost  of  illness
18
 In  Hong  Kong,  49428  cases  (3.2%)  of  discharges/death  related  to  diseases  of  the 
musculoskeletal  system  and  connective  tissue  in  2007
4
 The  increased  recreational  sport  and  elite 
consideration have drawn more societal concerns on effective treatment for sport injuries, including various 
forms of ligament  and  tendon injuries, which  have  taken  up significant health  care  resources.  However, 
medical research to improve  healing outcomes of tendon and ligament injuries is  far lagged behind. Our 
research team has investigated tendon and ligament healing since 1995. In the past 14 years, we received 9 
Research  Grant  Committee  Earmarked  grants  and 7  CUHK  direct  grants,  generating  88  publications  in 
peer-reviewed journals. (Annex No.1) 
Tendon and ligament injuries are notorious with the slow healing rate and compromised mechanical 
restoration. We have studied tendon healing in a rat model of patellar tendon healing up to 6 months post 
injury
35
. This rat model mimics the clinical case of patellar tendon injury when the central-one third of the 
patellar tendon was used as a graft for ACL reconstruction. In this animal model and in tendon cell culture 
studies,  we  have  investigated  the  effects  of  growth  factors
31,37,17,14,22,27,26,23
 traditional  Chinese  herbal 
medicine
21
and  biophysical  intervention
10 
to  promote  tendon  healing.  Recently  we also  investigated the 
beneficial effects of mesenchymal stem cells, biomaterials and bisphophanates (a class of drugs that inhibit 
bone resorption) in rabbit
2,11
and rat models of ACL reconstruction (Annex  no.2). With these studies, we 
established numerous  techniques  for  histological, biochemical  and mechanical assessments of tendon and 
ligament healing.   
In our previous study, we found that cellular activities are changing in different healing stages
15
, and 
earlier application of biophysical intervention exhibited better effects to improve healing outcomes
18
. Natural 
healing process of tendon and ligament injuries involves four different stages: inflammation, cell recruitment, 
granulation and remodeling. Previous attempts to promote tendon and ligament healing mainly targeted on 
latter events such as enhancement of cell proliferation and matrix synthesis
23,26,31
; but modulation of earlier 
events,  especially  in  the  inflammatory  stage,  has  not  been  explored.  Anti-inflammatory  treatments  are 
commonly prescribed to tendon and ligament injuries to relieve symptoms; but its negative effects on tendon 
and ligament healing are now clear, since some pro-inflammatory mediators (i.e. prostaglandins) are crucial to 
trigger early healing events such as neo-vascularization
3
It is possible that optimization of these early 
healing events during the inflammatory stage of healing will be a more effective way to improve the 
healing  outcomes. During inflammatory stage of tendon and ligament healing, inflammatory cells are 
recruited to the injured sites to tackle with potential microbial infection and clear the damaged tissues. At this 
stage,  significant  oxidative  stress  prevails  and  neovascularization  occurs.  Neovascularization is  the  most 
important event in  this early  healing  stage  by bringing  healing cells, nutrients  and oxygen  for  the repair 
process. Since overwhelming oxidative stress is harmful to tendon cells
20
, reduction of oxidative stress by 
antioxidants such as  vitamin C (L-ascorbic acid) may exert protective effects. In  addition to its powerful 
antioxidant activity, vitamin C also exerted protection on vascular cells by modulation of nitric oxide synthase 
expression, enhancement of cell  growth, attachment and migration in vascular smooth muscles cell
32,13,37
Extremely low levels of ascorbate occur in patients and animals after trauma and infection, and early repletion 
requires  injection  of  supraphysiological  doses  of  ascorbate
19.28
 These  evidence  suggest  that  early 
supplementation of vitamin C may have beneficial effects for wound healing. A recent study reported that 
intraperitoneal injection of high dose vitamin C promote Achilles tendon healing as revealed by histological 
findings
7
. In a chicken model of flexor tendon repair, we found that a single bolus injection of vitamin C after 
surgical  repair  could  reduce  the  extent  of tendon  adhesion  and  hence  promote  functional  restoration. It 
suggests that local application of vitamin C at very early stages of healing (after surgical repair) can promote 
tendon  and  probably  ligament  healing,  since  oxidative  stress  and  neovascularization  are  important 
determinants for both tendon and ligament healing. As Vitamin C has a very high safety profile
24
, it gains the 
merits of high applicability for clinical use. Since surgical irrigation saline (sterile isotonic sodium chloride 
solution) is used for draining and cleansing during surgical operation, it may be the best carrier for vitamin C 
during  surgical operation.    In the present research project, we  propose to  develop  the use  of vitamin  C 
irrigation solution to promote tendon and ligament  healing. pre-clinical  trials  will be performed in  animal 
Appendix IV
VB.NET PDF Text Add Library: add, delete, edit PDF text in vb.net
Read: PDF Image Extract; VB.NET Write: Insert text into PDF; Add Image to PDF; VB.NET Protect: Add Password to VB.NET Annotate: PDF Markup & Drawing. XDoc.Word
how to add text to pdf file with reader; add text to a pdf document
C# PDF Text Add Library: add, delete, edit PDF text in C#.net, ASP
Read: PDF Image Extract; VB.NET Write: Insert text into PDF; Add Image to PDF; VB.NET Protect: Add Password to VB.NET Annotate: PDF Markup & Drawing. XDoc.Word
add text to pdf file online; how to insert text into a pdf file
ITSP 6.0
Page 5 of 25 
models with the advanced assessment methods we have established. 
1.2.   Any previously related project(s) undertaken by your organization and/or key project 
team members in the past five years and supported by the ITF or any other funding 
sources in Hong Kong and around the world?  If yes, please briefly describe the 
relevant/related project(s) and the source(s) of funding obtained for it (them). 
In  the  past  5  years,  our  project  team  members  have  received  4  grants  from General Research Fund 
(formerly competitive earmarked grant, Research Grant Committee) which are related to the present 
proposal (Annex no.1): 
1. 
Use of Bisphosphonate to Inhibit Local Bone Resorption and Improve Healing of Tendon Graft to Bone 
Tunnel. (PI: Prof. Lui PPY, duration: 2009-2011)
In this project, we established a rat model of ACL reconstruction with histological examination on decalcified 
samples of the graft incorporation and mechanical test for the ultimate loading of the reconstructed ACL. The 
temporal changes  of the healing outcomes were recorded. This information will be useful  for the present 
research project. 
2. 
Augmentation of Tendon Graft Healing within Bone Tunnel Using In-Situ Setting, Calcium Phosphate 
Bone Cement Complement with Autologous Mesenchymal Stem Cells (PI: Prof. Chan KM, duration: 
2007-2009)
In this project, we used a rabbit model of ACL reconstruction to investigate the effects of  stem  cells and 
biomaterials.  The  surgical  techniques  were  modified  for  the  establishment  of  the  rat  model  of  ACL 
reconstruction. 
3. 
The use of antioxidants to reduce tendon adhesion (PI: Prof. Hung LK, duration (2007-2009)
In this project, we evaluated the effect of peritendinous vitamin C/vitamin E injection (immediately after 
surgical repair) on the development of tendon adhesion. The results showed that vitamin C given as a single 
bolus injection can reduce the extent of tendon adhesion probably thorough its anti-oxidant effects. It inspired 
our  idea to develop  vitamin C irrigation solution  to  promote  tendon  and  ligament healing in the present 
proposal. 
4. 
An experimental study on the use of low intensity pulsed ultrasound to optimize patellar tendon healing 
in a rat model (PI: Prof. LK Hung, duration:2004-2007)
In this  project,  we  used  a  well-established  rat model  of  patellar tendon  injury to  evaluate  the  effect  of 
therapeutic ultrasound. We found that earlier biophysical intervention by LIPUS exhibited better effects to 
improve  healing  outcomes.  The  time  points  of  different  healing  stages  in  this  model  (inflammation, 
granulation and remodeling) were defined, which will be used as references for sampling time points in the 
present proposal. 
1.3.   Any other R&D work or projects similar to this application done or being carried out 
by other parties in Hong Kong and around the world?  If yes, please set out the 
findings  and  explain  how  your  approach  is  compared  to  others  in  terms  of 
technological superiority, production costs, market acceptability, etc. 
To the best of our knowledge, we are the first group proposing the addition of Vitamin C in surgical 
irrigation solution. From a  search  in the  free  patent online (http://www.freepatentsonline.com/),  only two 
expired  and  one  current  items  related  to  surgical  irrigation  saline  was  found  (US4504493,  US4872865, 
US20060205657). Modifications of surgical irrigation saline have been proposed in other aspects, including 
addition of  antiseptics to  reduce  chance of infection
8
, detergents
25
and supplementation  of epinephrine  to 
reduce bleeding
30,34
. However, up-to-date there are no reports describing the feasibility of modified surgical 
irrigation solution to optimize tendon/ligament healing. 
A  recent study reported intraperitoneal injection of  high dose vitamin may  promote Achilles tendon 
healing as revealed by histological findings
7
. Instead of systemic administration by intraperitoneal injection, 
we investigated the effect of peritendinous injection of vitamin C on tendon adhesion in a chicken model of 
flexor tendon repair
1
and positive results were reported
6
(Annex no.3). Due to the difficulty to keep injected 
vitamin C in peri-tendinous space, we propose to supplement vitamin C in irrigation solution in the present 
proposal. This will simplify the application procedure and circumvent the problem of leakage. In a pilot study 
we showed that irrigation of 5 ml vitamin C solution significantly increased neovascularization into tendon 
wound in the rat model of patellar tendon injury (Annex no.4, 5). It suggested that vitamin C supplementation 
may be an added value to surgical irrigation solution for a better healing outcome. 
Appendix IV
VB.NET PDF Text Box Edit Library: add, delete, update PDF text box
Read: PDF Image Extract; VB.NET Write: Insert text into PDF; Add Image to PDF; VB.NET Protect: Add Password to VB.NET Annotate: PDF Markup & Drawing. XDoc.Word
how to insert text into a pdf; add text field pdf
ITSP 6.0
Page 6 of 25 
With its safety profile 
24
, low cost and potential  beneficial effects to promote tendon and ligament 
injuries, vitamin C irrigation solution would have an advantage in terms of cost, technological feasibility and 
market acceptability, as compared to all commercially available surgical irrigation saline. It is foreseeable that 
extra intra-operative care will be achieved by this value-added surgical irrigation solution. 
1.4.   Any pilot work has already done by your organization and/or project team members 
in preparation for this project?  If yes, please describe the work done. 
Our team has established a full range of experimental techniques to evaluate the healing outcomes of tendon 
and ligament injuries in rat models: 
1.
Animal models 
A well-established rat model of patellar tendon injury will be used for evaluation of the effects of vitamin C 
irrigation solution on tendon injuries. We have published 12 papers (Annex 1)on this model and monitored the 
structural and functional restoration of the injured tendons up to 6 months post injury. The healing outcomes of 
patellar tendon injuries are evaluated by histology and mechanical tests as routine. For evaluation on ligament 
injuries,  we  have established  a rat  model  of  ACL reconstruction  with  characterization  on  histology  and 
mechanical properties of the graft. A conference abstract based on this model was accepted by International 
Symposium of tendon and Ligament X to be held on 5 Feb 2010. (Annex no.2) 
2.
Measurement  of  neovascularization  in  healing  patellar  tendon  by  High  resolution    3-D  Doppler 
ultrasound imaging 
We developed the use of high resolution ultrasound imaging to monitor tendon healing in rat patellar tendon 
injury (Annex no.6). The changes in wound size, tendon swelling and echo textures of the healing tendon were 
monitored  up to  day  42  post injury.   Since  the  extent of  neovascularization is  deterministic  for  healing 
outcomes, we also developed a quantitative measurement of vascularity in the tendon wound by 3-D Doppler 
ultrasound  imaging
12
(Annex  no.7).  These techniques  will  be  used to  evaluate  the effects  of  vitamin  C 
irrigation solution. 
3.
Animal gait analysis to measure painful response associated with tendon and ligament injuries   
We have developed the use of video-assisted gait analysis to monitor painful responses in a rat model with 
collagenase-induced  patellar  tendon  injuries.  We  found  that  the  injured  rats  exhibited  abnormal  gait 
parameters on both the injured limbs and the contralateral control limbs as compared to the control group with 
saline injection
(Annex no.8). Gait changes associated with pain could also be monitored in rat models of 
knee injuries, including ACL deficiency and traumatic patellar tendon injuries. As a result, video-assisted gait 
analysis will be employed to evaluate functional changes related to the healing outcomes of injured ACL or 
patellar tendons after supplementation of vitamin C in surgical irrigation solution. 
4.
Effects of Vitamin C injection on tendon adhesion in a chicken model of flexor tendon repair. 
On the potentials of vitamin C supplementation to optimize tendon healing, we have almost completed an 
Earmarked grant entitled 
the use of antioxidants to reduce tendon adhesion
. In a chicken model of flexor 
tendon repair, we established a new method to evaluate the severity of tendon adhesion (Annex no.10). We 
also found that local injection of vitamin C could reduce oxidative stress and reduce tendon adhesion, which 
was demonstrated as a decrease in gliding resistance and improved range of motion
6
(Annex no.3). Based on 
these findings, we propose that supplementation of vitamin C in surgical irrigation solution may be also be 
useful in other tendon and ligament injuries, and a pilot study was performed in a rat model of patellar tendon 
injury. 
5.
Effects of vitamin C irrigation solution on patellar tendon healing 
In a pilot study, we compared the effect of vitamin C irrigation saline (30 mg/mL) on tendon healing with 
normal saline as control. During the surgical procedure of induction of patellar tendon injury, either 5 ml of 
vitamin C saline or normal saline was used to cleanse the wound. The patellar tendons were washed before 
injury was induced, during the removal of central-one-third of the patellar tendon, and after the fascia was 
closed  by  sutures.  The  preliminary  data  showed  that  vitamin  C  irrigation  (n=6)  significantly  increased 
neovascularization in the tendon wound at day 4 post injury as compared to normal saline irrigation saline 
group (n=6) (Annex no.4 & 5). It suggests that vitamin C irrigation solution may have a positive effect on the 
Appendix IV
ITSP 6.0
Page 7 of 25 
healing outcomes of patellar tendon injury. 
1.5.    Any  request  for funding  support  for  this  application  previously rejected by  ITF, 
Research  Grants  Council  (RGC)  and/or  other  Government-administered  funding 
schemes?  If yes, please set out the project reference of the previous application. 
No, this is a new project. 
1.6.  If this application is a previously rejected application under ITF, any major differences 
of this application vis-à-vis the previous one?  Please explain how these differences 
have addressed the previously raised concerns. 
Not applicable. 
1.7.   Any attempt made or being made to seek funding support for this project from other 
funding sources in Hong Kong and around the world (e.g. RGC, Applied Research 
Fund, Environment and Conservation Fund, etc.)?  Please advise any known results 
of the application(s). 
No. 
References: 
1.  Fu SC, Hung LK, Lee YW, Mok TY, Chan KM. (2010) A novel approach to measure tendon adhesion 
by video-assisted gliding test in a chicken model. J Hand Surg (Eur). (Accepted) 
2.  Lui PP, Lee YW, Mok TY, Cheuk YC, Fu SC, Ho G, Chan KM. (2010) The effect of alendronate on the 
mechanical strength of the tendon graft to bone tunnel complex after ACL reconstruction. ISL&T X 
2010 Hong Kong. 
3.  Chan KM, Fu SC. (2009) Anti-inflammatory management for tendon injuries – friends or foes? Sports 
Med Arthrosc Rehabil Ther Technol. 1:23. 
4.  Health Facts of Hong Kong 2009 Edition. (2009) Department of Health, Hong Kong SAR. 
5.  Fu SC, Chan KM, Chan LS, Fong DT, Lui PP. (2009) The use of motion analysis to measure 
pain-related  behaviour  in  a  rat  model  of  degenerative  tendon  injuries.  J  Neuosci  Methods. 
179(2):309-18. 
6.  Fu SC, Hung LK, Shum A, Lee YW, Mok TY, Lui PP, Chan KM. (2009) Local vitamin C injection 
reduced tendon adhesion in a chicken model of injured flexor digitorum profundus tendon injury. 
ISL&T IX 2009 Las Vegas. 
7.  Ömeroğlu S, Peker T, Türközkan N, Ömeroğlu H. (2009) High-dose vitamin C supplementation 
accelerates the Achilles tendon healing in healthy rats. Arch Orthop Trauma Surg 129:281-286. 
8.  Owens BD, White DW, Wenke JC (2009) Comparison of irrigation solutions and devices in a 
contaminated musculoskeletal wound survival model. J Bone Joint Surg Am 91:92-8. 
9.  Wen CY, Qin L, Lee KM, Chan KM. (2009) Peri-graft bone mass and connectivity as predictors for 
the strength of tendon-to-bone attachment after anterior cruciate ligament reconstructions. Bone. 
45(3):545-52. 
10.  Wen CY, Qin L, Lee KM, Chan KM. (2009) The use of brushite calcium phosphate cement for 
enhancement of bone-tendon integration in an anterior cruciate ligament reconstruction rabbit model. 
J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 89B(2):466-74. 
11.  Wen  CY,  Qin  L,  Lee  KM,  Wong  MW,  Chan  KM.  (2009)  Influence  of  bone  adaptation  on 
tendon-to-bone healing in bone tunnel after anterior cruciate ligament reconstruction in a rabbit 
Appendix IV
ITSP 6.0
Page 8 of 25 
model. J Orthop Res. 27(11):1447-56. 
12.  Mok TY, Fu SC, Qin L, Hung LK, Lui PP. (2009) Characterization of angiogenesis in tendon healing 
by 3-D Doppler Ultrasound Imaging. HKOA 2009. 
13.  Aguirre R, May JM. (2008) Inflammation in the vascular bed: Importance of vitamin C. Pharmacol 
Ther. 119:96-103. 
14.  Chan KM. Fu SC. Wong YP. Hui WC. Cheuk YC. Wong MW. (2008) Expression of transforming 
growth factor beta  isoforms  and their roles  in tendon healing. Wound Repair & Regeneration. 
16(3):399-407. 
15.  Fu SC, Cheuk YC, Chan KM, Hung LK, Wong MW. (2008) Is cultured tendon fibroblast a good model 
to study tendon healing? J Orthop Res. 26(3):374-383. 
16.  Fu SC, Shum WT, Hung LK, Wong MW, Qin L, Chan KM. (2008) Low-intensity pulsed ultrasound on 
tendon healing: a study of the effect of treatment duration and treatment initiation. Am J Sports Med. 
36(9):1742-9. 
17.  Chan BP, Fu SC, Qin L, Rolf C, Chan KM. (2006) Supplementation-time Dependence of Growth 
Factors in Promoting Tendon Healing. Clin Orthop Relat Res. 448:240-7. 
18.   “Straighten Up” Events Backbone of World Spine Day Press Release. (2006) The Bone and Joint 
Decade 2000-2010. 
19.  McGregor GP, Biesalski HK. (2006) Rationale and impact of vitamin C in clinical nutrition. Curr Opin 
Clin Nutr Metab Care. 9(6):697-703. 
20.  Pouzaud F, Dutot M, Martin C, Debray M, Warnet JM, Rat P. (2006) Age-dependent effects on redox 
status, oxidative stress, mitochondrial activity and toxicity induced by fluoroquinolones on primary 
cultures of rabbit tendon cells. Comp Biochem Physiol C Toxicol Pharmacol. 143(2):232-41. 
21.  Fu SC, Hui CW, Li LC, Cheuk YC, Qin L, Gao J, Chan KM. (2005) Shaji TFH promotes early 
restoration of mechanical properties in healing patellar tendon. Medical Engineering & Physics. 
273:13-321. 
22.  Fu SC, Wong YP, Cheuk YC, Lee KM, Chan KM. (2005) TGF-beta1 reverses the effects of matrix 
anchorage on the gene expression of decorin and procollagen type I in tendon fibroblasts. Clin 
Orthop Relat Res. 431:226-32.  
23.  Wong YP, Fu SC, Cheuk YC, Lee KM, Wong MW, Chan KM. (2005) Bone morphogenetic protein 13 
stimulates cell proliferation and production of collagen in human patellar tendon fibroblasts. Acta 
Orthop. 76(3):421-7. 
24.  Safety 
data 
(MSDS) 
for 
ascorbic 
acid. 
Oxford 
University. 
(2005) 
http://msds.chem.ox.ac.uk/AS/ascorbic_acid.html 
25.  Anglen JO, Gainor BJ, Simpson WA, Christensen G (2003) The use of detergent irrigation for 
musculoskeletal wounds. Int Orthop 27:40-6. 
26.  Fu SC, Wong YP, Chan BP, Pau HM, Cheuk YC, Lee KM, Chan KM. (2003) The roles of bone 
morphogenetic protein (BMP) 12 in stimulating the proliferation and matrix production of human 
patellar tendon fibroblasts. Life Sci. 72(26):2965-74. 
27.  Fu SC, Chan BP, Wang W, Pau HM, Chan KM, Rolf CG. (2002) Increased expression of matrix 
metalloproteinase 1 (MMP1) in 11 patients with patellar tendinosis. Acta Orthop Scand 73(6): 
658-62. 
28.  Long  CL,  Maull KL, Krishnan RS, Laws  HL, Geiger  JW,  Borghesi  L, Franks W, Lawson TC, 
Sauberlich  HE.  (2003)  Ascorbic  acid  dynamics  in  the  seriously  ill  and  injured.  J  Surg  Res. 
109(2):144-8. 
29.  黄艳萍,傅世铨,胡晞棠,陈佩,包汉民,李广文,熊良俭,陈启明. (2003) 骨形态发生蛋白 12,13 对促进髌腱
愈合的体外细胞培养研究.中华医学杂志83(13):1192-1193. 
30.  Jensen KH, Werther K, Stryger V, Schultz K, Falkenberg B (2001) Arthroscopic shoulder surgery 
with epinephrine saline irrigation. Arthroscopy 17(6):578-81. 
31.  Chan BP, Fu SC, Qin L, Lee KM, Rolf CG, Chan KM. (2000) Effects of basic fibroblast growth factor 
(bFGF) on early stages of tendon healing. Acta Orthop Scand. 71(5):513-8. 
32.  Huang A, Vita JA, Venema RC, Keaney, JF Jr. (2000) Ascorbic acid enhances endothelial nitric-oxide 
synthase activity by increasing intracellular tetrahydrobiopterin. J Biol Chem. 275, 17399-406. 
33.  Lin JH, Wang MX, Wei A, Zhu W, Diwan AD, Murrell GA. (2000) Temporal expression of nitric oxide 
synthase isoforms in healing Achilles tendon. J Ortho Res. 19:136-42. 
34.  Olszewski AD,  Jones R,  Farrell  R, Kaylor K.  (1999) The effects of dilute epinephrine saline 
irrigation on the need for tourniquet use in routine arthroscopic knee surgery. Am J Sports Med 
27:354-6. 
35.  Chan BP, Fu SC, L Qin, Rolf C, Chan KM. (1998) Pyridinoline in relation to ultimate stress of the 
patellar tendon during healing- An animal study. Journal of Orthopaedic Research, 16: 597-603. 
36.  Rocnik EF, Chan BM, Pickering JG. (1998) Evidence for a role of collagen synthesis in arterial 
smooth muscle cell migration. J Clin Invest 101:1889-98. 
Appendix IV
ITSP 6.0
Page 9 of 25 
37.  Chan BP, Chan KM, Maffulli N, Webb S, Lee KK. (1997) Effect of basic fibroblast growth factor. An 
in vitro study of tendon healing. Clin Orthop. 342: 239-47. 
2.   Implementation Approach 
2.1.  Please elaborate on the technology to be developed and/or the innovative use of 
existing technologies.  The brief information provided in Section A is relevant. 
In order to develop a value-added surgical irrigation saline, we plan for a two-staged investigation. 
Stage I:
In the first stage, we shall characterize vitamin C irrigation solution with respect to pH and stability of vitamin 
C upon different storage conditions. Osmolarity (290-310 mOsm) and pH (7.30-7.40) at physiological levels 
are the general properties of surgical irrigation saline, which will not impose extra stresses in osmotic pressure 
and pH to the irrigated tissues. Since the reduced form of vitamin C (ascorbate) carries most of its biochemical 
activities, the  stability  of  ascorbate  would  determine the  shelf-life  of the vitamin  irrigation  solution.  As 
ascorbate  undergoes  auto-oxidation  to  become  L-dehydroascorbate,  changes  in  pH  or  bioactivity  of  the 
vitamin C irrigation solution should be checked according to storage temperature and time. On the other hand, 
since auto-oxidation will not affect solubility of the salts, the osmolarity will be relatively stable. Since oxygen 
is the key factor of ascorbate degradation, deoxygenated water will be used to prepare vitamin C irrigation 
solution. In our research plan, three doses (30, 10, 3 mg/mL) of vitamin C (in the form of sodium L-ascorbate) 
will be added to the deoxygenated Milli-Q water for the investigation in stage II. Sodium chloride will be 
added to the vitamin C solution to reconstitute a solution with physiological osmolarity (300 mOsm) as both 
sodium ascorbate and sodium chloride will be completely dissolved at these concentrations. The concentration 
of the vitamin C and the pH values of the irrigation solution will be measured daily for the first five days and 
then once every five days for a total of 30 days, after preparation in order to check for the product stability. 
The monitoring will also be performed under storage at 4
C, 25
C and 37
C; since temperature may affect the 
stability of the irrigation solution. For the experiments in stage II, all vitamin C irrigation solutions and normal 
physiological saline will be freshly prepared at  room temperature (25
C). Since it is well-recognized that 
vitamin C is non-toxic and vitamin C saline at the chosen concentration is a non-viscous solution, the vitamin 
C irrigation solution will be suitable for the use in animal surgery after sterilization by passing through a 0.22 
m filter (Millipore). 
Stage II:
In stage II, the effects of vitamin C irrigation solution will be evaluated in rat models of patellar tendon injury 
and ACL reconstruction. Although rodents possess the L-gluconolactone oxidase and can synthesize vitamin C 
in liver
26
, numerous experimental studies showed that vitamin C supplementation still exerted physiological 
effect on rats including antioxidation
10
, metablosim
9
and neural functions
12
. These findings suggest that the 
normal vitamin C synthetic capacity in rats plus dietary intake may not be sufficient to cope with the needs in 
different physiological or pathological conditions. The ascorbic acid body pool of rats average 10.7 mg/100 g 
body weight. Daily synthesis is average 2.6 mg/100 g body weight
15
. Though plasma level of vitamin C is 
usually around 30-60 
μ
M, intracellular ascorbate level is normally exceeds 100 
μ
M due to active transport, 
which is the effective concentration to scavenge superoxide anions
16,24
. Thus local administration of vitamin C 
(from 3 mg/mL (15 mM) to 30 mg/mL (150 mM)) can replenish ascorbate to the injured tissues when vascular 
supply is disrupted during surgical repair of tendon and ligament injury. 
1.  Effects of vitamin C irrigation solution in a rat model of patellar tendon injury 
Throughout the surgical procedures of induction of the patellar tendon injury, 5 ml of vitamin C irrigation 
solution (3, 10 or 30 mg/mL) or normal saline will be used to cleanse the tendons. 3-D Doppler ultrasound 
imaging will be used to monitor knee swelling (signs of inflammation) and neovascularization at day 1, 4, 7 
post injury. Immunohistochemistry of neurophil (neutrophil elastase) and macrophage (ED1) markers will be 
used to detect inflammatory infiltration into the tendon wound; and immunohistochemical staining of CD 31 
will be used to detect blood vessels in the wound histologically. The expression of various forms of nitric 
oxide  synthase  (inducible  iNOS,  endothelial  eNOS,  neuronal  bNOS)
20
will  also  be  detected  by 
immunohistochemistry, since they are responsive to ascorbate
s modulation and mediate a number of vascular 
Appendix IV
Documents you may be interested
Documents you may be interested