mvc view to pdf itextsharp : Add text box in pdf document control Library system web page .net html console 92015006330-part1602

GHK-Cu improved antero-posterior knee laxity after ACL reconstruction in rat 
Fu SC
1,2
, Cheuk YC
1,2
, Cheng WH
1,2
, Yung SH
1,2
, Chan KM
1,2
1
Department of Orthopaedics and Traumatology, Faculty of Medicine, 
2
The Hong 
Kong Jockey Club Sports Medicine and Health Sciences Centre, Faculty of Medicine, 
The Chinese University of Hong Kong. 
Introduction:   
Anterior cruciate ligament reconstruction (ACLR) is a standard surgery for ACL 
ruptures. Although knee laxity can be restored after surgery, biological healing of the 
graft is often slow and can compromise the surgical outcomes. 
Glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu (II)
(GHK-Cu) is a well-known activator of tissue 
remodeling. In this study, the effect of GHK-Cu on ACLR was investigated in a 
well-established rat model [1].   
Materials and methods:   
Unilateral ACLR using flexor digitorum longus tendon graft was performed in 12 rats, 
which are assigned to either GHK group or saline group (n=6).The rats were given 
weekly intra-articular injections with either saline or 0.3mg/ml GHK-Cu for 4 weeks. 
Rats were sacrificed at week 6 post operation. Antero-posterior (A-P) knee laxity was 
determined. Graft incorporation was examined by pull-out test.   
Results:   
After ACLR, rats treated with GHK-Cu resulted in a smaller side-to-side difference in 
AP-knee laxity as compared to saline group (Mann-Whitney test, p=0.03), indicating a 
better functional restoration. However, there was no significant difference in 
ultimate load between GHK-Cu group and saline group (p=0.936). All grafts failed at 
mid-substance during the pull-out test.   
Discussion and conclusion: 
GHK-Cu may improve A-P knee laxity after ACLR. Further studies are necessary to 
investigate the underlying mechanisms and determine the optimal dose. 
References: 
[1] Fu SC, et al. KSSTA. 2012   
Appendix IVC GHK HKOA
Add text box in pdf document - insert text into PDF content in C#.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
XDoc.PDF for .NET, providing C# demo code for inserting text to PDF file
how to add text fields to pdf; how to insert text in pdf reader
Add text box in pdf document - VB.NET PDF insert text library: insert text into PDF content in vb.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Providing Demo Code for Adding and Inserting Text to PDF File Page in VB.NET Program
add text pdf file; adding text to pdf in reader
INTRA-ARTICULAR INJECTION OF TRIPEPTIDE COPPER COMPLEX GHK-CU (II) IMPROVED 
GRAFT HEALING IN ANTERIOR CRUCIATE LIGAMENT RECONSTRUCTION 
Sai-Chuen Fu
1
, Yau-Chuk Cheuk
1
, Wai-Hang Cheng
1
, Shu-Hang Yung
1
, Christer G Rolf
2
, Kai-Ming Chan
1
Department of Orthopaedics and Traumatology, Faculty of Medicine, Faculty of Medicine, The Chinese 
University of Hong Kong. 
2
Department of Orthopaedic Surgery, Huddinge University Hospital, CLINTEC, 
Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden 
INTRODUCTION: Anterior cruciate ligament reconstruction (ACLR) is the standard treatment to restore knee 
function. However, the biological healing of the graft is often slow and poor healing can lead to ACLR failure 
and excessive knee laxity. If this process can be further enhanced, it will reduce the time of maturation of the 
graft, and hence earlier returns to full activities and sports. In the present study, the possibilities of biological 
augmentation of graft healing in ACLR were investigated. Recent findings show that bioactive small molecules 
such as matrikines may also take part in tissue remodeling. Matrikines are small peptides liberated by partial 
proteolysis of extracellular matrix macromolecules, which are able to regulate cell activities. Among different 
classes of  matrikines, Glycyl-Histidyl-Lysine (GHK) tripeptide and its copper (II) chelated form (GHK-Cu) 
exhibit profound involvements in the tissue remodeling processes. GHK have been extensively used  in the 
cosmetic industry for skin tissue remodeling for years with its high safety profile in humans. GHK-Cu can 
simultaneously activate the in vivo  synthesis of matrix components, and the in vivo  production of degradative 
enzymes and the inhibitors. GHK-Cu can promote bone healing and promote implant attachment to bony tissues. 
It can also act as chemoattractant for repair cells and induce wound angiogenesis. It is possible that GHK-Cu can 
promote graft healing in ACLR. 
METHODS: The animal experiments in this study were approved by the Animal Experimentation Ethics 
Committee in authors’ institution (Ref. no.: 11/054/GRF and 460611). The procedures of ACLR were performed 
on the right knee according to our previous study. Seventy-two male Sprague Dawley rats (12 weeks old, 400-
450g) were used. Intra-articular injection (50µl per injection) of saline or GHK-Cu solution (0.3 or 3 mg/ml) was 
performed weekly from 2nd week to 5th week post operation. At 6 or 12 weeks post-operation, the rats were 
euthanized to harvest knee specimens for static anterior-posterior (AP) knee laxity test and graft pull-out test 
(n=8). Histological scoring on H&E stained sections was performed (n=4) with polarization microscopy. A 2-
way  ANOVA  was  used  to  analyze  the  effect  of  time  and  treatment  on  the  outcome  measures.  Statistical 
significance was accepted at α=0.05
RESULTS: At 6 weeks post operation, rats treated with 0.3 or 3 mg/ml GHK-Cu resulted in a significantly 
smaller side-to-side difference in AP-knee laxity as compared to saline group, but no difference in AP laxity was 
detected at 12 weeks post operation (p=0.531) (Figure 1). There was no significant difference in pull-out strength 
of the graft complex between GHK-Cu groups and saline group at 6 and 12 weeks post operation (p=0.301, 
0.834), however, the stiffness of the graft complex was significantly higher in 0.3 mg/ml GHK-Cu as compared 
to saline group at 6 weeks post operation (p=0.007). All grafts failed at mid-substance during the pull-out test. 
Histological examination showed that graft incorporation and bone healing inside tunnels was significantly better 
in the GHK-Cu treated groups. Graft degeneration as shown by decreased collagen birefringence was less severe 
in the 0.3 mg/ml GHK-Cu group as compared to saline group, but significantly increased cell recruitment to graft 
mid-substance in 3 mg/ml GHK-Cu group also rendered poor graft integrity (Figure 2).  
DISCUSSION: Our study suggests that GHK-Cu may improve graft healing in ACLR. GHK-Cu may improve 
tissue remodeling in graft mid-substance and graft tunnel interface, but extensive tissue remodeling may not be 
beneficial as shown in 3 mg/ml GHK-Cu group. Further studies are necessary to investigate the underlying 
mechanisms for the observed effects of GHK-Cu. As restoration of A-P knee laxity after ACLR was improved at 
earlier time point,  biological enhancement in graft healing by GHK-Cu may imply earlier return to normal 
activity after operation. However, as the pull-out strength was not improved, high demand activities may not be 
warranted safe. There are still plenty of rooms for biological augmentation of graft healing in ACLR.  
Figure 1 
Figure 2 
Appendix IVD GHK ISLT
VB.NET PDF Text Box Edit Library: add, delete, update PDF text box
Protect. Password: Set File Permissions. Password: Open Document. Edit Digital Highlight Text. Add Text. Add Text Box. Drawing Markups. PDF Print. Work with
how to add text field to pdf form; add text to pdf using preview
C# PDF Text Box Edit Library: add, delete, update PDF text box in
NET SDK library for adding text box to PDF document in .NET WinForms application. A web based PDF annotation application able to add text box comments to adobe
add text to pdf in preview; adding text fields to a pdf
ITSP 6.0
Ref. No.-ITS/444/09 
Date/Time of Receipt- 
(For Official Use) 
Application for 
the Innovation and Technology Fund 
Innovation and Technology Support Programme 
- Tier 3 - 
Development of a Vitamin-C Surgical Irrigation Solution to 
Improve Healing Outcomes of Surgical Repair of Tendon and 
Ligament Injuries 
Submitted by
The Chinese University of Hong Kong 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
C# PDF Annotate Library: Draw, edit PDF annotation, markups in C#.
installed. Support to add text, text box, text field and crop marks to PDF document. Able class. C#.NET: Add Text Box to PDF Document. Provide
adding text field to pdf; add text to pdf without acrobat
C# WPF PDF Viewer SDK to annotate PDF document in C#.NET
Line color. Select the line color when drawing annotations on PDF document. 15. Description. 17. Text box. Click to add a text box to specific location on PDF page
how to add a text box in a pdf file; adding text to pdf in preview
ITSP 6.0
Page 1 of 25 
Section A 
Basic Information
(When an application is approved, the information in this section will be published at the ITF website (denoted with #) 
and/or carried forward as pre-filled data in the related progress/final reports.) 
1. Project Title# 
1.1.  English (not more than 20 words): 
Development of a Vitamin-C Surgical Irrigation Solution to Improve Healing Outcomes of 
Surgical Repair of Tendon and Ligament Injuries 
1.2.  Chinese (not more than 30 words): 
開發維س素 C 沖洗液以促進肌腱及韌൅損傷的術後癒合
2.  Abstract# 
(Please provide a brief summary of the objectives, R&D methodology and the impacts and benefits of the project.) 
2.1.  English (not more than 200 words): 
Tendon and ligament injuries are very common sporting and occupational injuries. Surgical 
repair provides a mechanically stable micro-environment for the tendons or ligaments to 
heal, but the healing outcomes are always compromised by the low innate healing capacity. 
Thus it is important to study potential treatments to promote the innate healing capacity. 
We discovered that surgical irrigation with vitamin C solution may be able to improve 
healing in animal models. Conventional surgical irrigation solution only acts as neutral fluid 
to cleanse the surgical sites. Limited modifications of surgical irrigation solution have been 
proposed to reduce infection or bleeding, but there is no investigation to develop irrigation 
solution with an added value to improve healing outcomes. We propose to develop a new 
formula of vitamin C supplemented surgical irrigation solution which can promote tendon 
and ligament healing. Pre-clinical studies in well-established animal models will be used to 
evaluate the effects of the new irrigation solution, and the results will be used to apply for 
patents. In the next stage of the product development, clinical trials could be conducted 
with industrial collaboration.      
2.2.  Chinese (not more than 300 words): 
肌腱及韌൅損傷是十分ൄ見的運動創傷和職業性勞損Ζ手術修復雖然為肌腱及韌൅損傷提供
了穩定的癒合微環境,但癒合成效往往受制於自身癒合能力不足Ζ故此,促進自身癒合能力
便成為改善療效的重要課題Ζ我們發現利ش維س素 C 沖洗肌腱創口有可能促進癒合Ζ一般沖
洗液僅為沖洗創口的中性液體;一些經改良的沖洗液配方能減少流血或感染風險,但是能夠
促進癒合的沖洗液則屬創新意念Ζ有見及此,我們建議研發一種嶄新的維س素 C 沖洗液以促
進肌腱及韌൅損傷的術後癒合Ζ我們利ش經多年驗證的動物模型,去收集有關維س素 C 沖洗
液在促進肌腱及韌൅癒合方面的實驗數據,作為申請專利註冊的基礎Ζ我們將於下一步進行
臨床測試,並與工業界共同開發有關產品Ζ      
3.  Objectives 
(Please state in clear and specific terms the technological challenges and what the proposal aims to achieve.)
1.  To develop a value-added surgical irrigation solution with Vitamin C supplementation in 
order to improve healing outcomes of tendon and ligament surgeries 
2.  To evaluate the effects of vitamin C supplemented solution in animal models of tendon and 
ligament injuries 
3.  To apply for patent on the formula of vitamin C supplemented solution and its application on 
tendon and ligament surgeries      
4.  R&D Methodology   
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
.NET PDF Document Viewing, Annotation, Conversion & Processing
PDF Write. Insert text, text box into PDF. Edit, delete text from PDF. Insert images into PDF. Add, Update, Delete form fields programmatically. Document Protect
how to add text fields to a pdf document; add text to pdf online
C# WinForms Viewer: Load, View, Convert, Annotate and Edit PDF
Highlight PDF text. • Add text to PDF document in preview. • Add text box to PDF file in preview. • Draw PDF markups. PDF Protection.
add text to pdf in acrobat; adding text to a pdf form
ITSP 6.0
Page 2 of 25 
(Please  provide  a  brief  description  of  the  technology  to  be  developed  and/or  the  innovative  use  of  existing 
technologies.   Details should be provided in Section C.)
In this project, we will develop a new value-added surgical irrigation solution with vitamin C 
(L-ascorbic acid) supplementation. Basically, surgical irrigation solution should be isotonic, 
non-viscous, non-toxic and non-antigenic. Vitamin C in the form of sodium L-ascorbate enjoys a 
very high safety profile and high solubility, which make it possible to constitute isotonic solution 
(290-310 mOsm/L) for surgical irrigation. Since the reduced form of L-ascorbate confers most 
of its biochemical activities, auto-oxidation of vitamin C into dihydroascorbate may entail a loss 
in bioactivities. In the first stage, we’ll formulate the vitamin C irrigation solution in 3 different 
doses at physiological osmolarity and pH, and test the product stability with respect to pH and 
ascorbate concentration under different storage conditions (i.e. temperature). In the second 
stage, the effects of vitamin C irrigation solution on tendon and ligament healing will be 
assessed in our well-established rat models of patellar tendon injury and anterior cruciate 
ligament (ACL) reconstruction respectively. As a well-known antioxidant, we have previously 
shown that vitamin C supplementation reduced the extent of oxidative stress in injured tendons. 
We speculate that modulation of post-surgical oxidative stress may be beneficial to tendon and 
ligament healing by promoting neovascularization and alleviating the extent of inflammation. 
The early effects of the vitamin C irrigation solution will be evaluated by histological 
examination of inflammatory infiltration, measurement of serum C-reactive protein 
(CRP)/interleukin-6 (IL-6) and 3-D Doppler ultrasound imaging for neovascularization; while the 
final healing outcomes will be assessed by histology, mechanical test and gait analysis. In the 
third stage, we shall patent the vitamin C irrigation solution in the US patent office and the 
China patent office based on our pre-clinical experimental data.      
5.  Deliverables# 
(Please set out the deliverables, itemized as appropriate, together with their detailed technical specifications, of the 
project.) 
5.1.  English 
1.  Pre-clinical evidences for the effectiveness of Vitamin C-supplemented surgical 
irrigation solution to optimize healing outcomes for tendon and ligament surgeries. 
2.  Patents for the application of Vitamin C supplemented irrigation solution in tendon and 
ligament surgeries to be filed in the patent offices in US and PRC.      
5.2.  Chinese 
1.  收集有關維س素 C 沖洗液能促進肌腱及韌൅術後癒合的臨床前實驗證據 
2.  有關維س素 C 沖洗液ش於肌腱及韌൅修復手術的專利註冊(美國Ε中國) 
6.  Dissemination Plan 
(Please provide a brief description of the activities that would be undertaken to promote the project deliverables to 
the target users.   Details should be provided in Section C.)
Since collection of pre-clinical data and application of patent are the primary goals of this 
project, the results could not be disclosed until the patents are filed. When the patents are filed, 
we plan to commercialize the prototype of vitamin C irrigation solution in the following steps: 
1.  Disclose our findings by submitting reports to International conferences and/or 
peer-reviewed journal. 
2.  Promotion of the patented technology (vitamin C irrigation solution) by printing a pamphlet to 
be distributed in the Hong Kong Med Fair 2011. 
3.  With the patents and plan for clinical trial, we shall contact the local and international 
manufacturers of surgical irrigation solution to seek for industrial collaboration for production 
and marketing.      
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
C# WPF Viewer: Load, View, Convert, Annotate and Edit PDF
Highlight PDF text in preview. • Add text to PDF document. • Insert text box to PDF file. • Draw markups to PDF document. PDF Protection.
how to add text to a pdf document using acrobat; how to add text to pdf file
C# PDF Sticky Note Library: add, delete, update PDF note in C#.net
Allow users to add comments online in ASPX webpage. Able to change font size in PDF comment box. which bring users quick and efficient working with PDF Document.
adding text to pdf form; adding text to a pdf document
ITSP 6.0
Page 3 of 25 
Section B 
Implementation Schedule
(When an application is approved, the information in this section will be published at the ITF website (denoted with #) 
and/or carried forward as pre-filled data in the related progress/final reports.) 
1.  Overall Schedule# 
(When planning the project commencement date, please consider that it may take of a few months to approve an 
application.) 
Commencement date (dd/mm/yyyy) 
1/9/2010 
Completion date (dd/mm/yyyy) 
31/8/2011 
Project duration (month) 
12 
2.  Project Milestones# 
(Please set out individual milestones to be achieved at different stages of implementation.  Detailed account should 
be provided Section C.) 
Per iod 
Milestones 
From 
(dd/mm/yyyy) 
To  
(dd/mm/yyyy) 
1/9/2010 
15/10/2010 
Formulation of vitamin C irrigation solution and test for basic 
properties and stability 
16/10/2010 
15/2/2011 
Investigation of efficacy of different dosages of Vitamin C 
irrigation solution in rat model of patellar tendon injury 
16/2/2011 
15/6/2011 
Investigation of efficacy of different dosages of Vitamin C 
irrigation solution in rat model of ACL reconstruction 
1/4/2011 
31/8/2011 
Data analysis and applying patents in PRC/US 
1/7/2011 
31/8/2011 
Preparation for final report of the project and submissions to 
international conferences and peer-reviewed journals 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
C# HTML5 PDF Viewer SDK to annotate PDF document online in C#.NET
Name. Description. 1. Add sticky note. Click to add a sticky note to PDF document. 4. Strikethrough text. Click to strikethrough text on PDF page. 6. Add text box
how to add text to pdf file with reader; how to add text box to pdf
VB.NET PDF - Annotate PDF with WPF PDF Viewer for VB.NET
Line color. Select the line color when drawing annotations on PDF document. 15. Description. 17. Text box. Click to add a text box to specific location on PDF page
adding text to pdf file; add text to pdf file online
ITSP 6.0
Page 4 of 25 
Section C 
Project Details
1.   Background 
1.1.    General background leading to this project. Please provide supporting documents, 
such as published papers by members of the project team or other researchers. 
Musculoskeletal disorders are leading cause of disability around the world, accounting for 25% of total 
cost  of  illness
18
 In  Hong  Kong,  49428  cases  (3.2%)  of  discharges/death  related  to  diseases  of  the 
musculoskeletal  system  and  connective  tissue  in  2007
4
 The  increased  recreational  sport  and  elite 
consideration have drawn more societal concerns on effective treatment for sport injuries, including various 
forms of ligament  and  tendon injuries, which  have  taken  up significant health  care  resources.  However, 
medical research to improve  healing outcomes of tendon and ligament injuries is  far lagged behind. Our 
research team has investigated tendon and ligament healing since 1995. In the past 14 years, we received 9 
Research  Grant  Committee  Earmarked  grants  and 7  CUHK  direct  grants,  generating  88  publications  in 
peer-reviewed journals. (Annex No.1) 
Tendon and ligament injuries are notorious with the slow healing rate and compromised mechanical 
restoration. We have studied tendon healing in a rat model of patellar tendon healing up to 6 months post 
injury
35
. This rat model mimics the clinical case of patellar tendon injury when the central-one third of the 
patellar tendon was used as a graft for ACL reconstruction. In this animal model and in tendon cell culture 
studies,  we  have  investigated  the  effects  of  growth  factors
31,37,17,14,22,27,26,23
 traditional  Chinese  herbal 
medicine
21
and  biophysical  intervention
10 
to  promote  tendon  healing.  Recently  we also  investigated the 
beneficial effects of mesenchymal stem cells, biomaterials and bisphophanates (a class of drugs that inhibit 
bone resorption) in rabbit
2,11
and rat models of ACL reconstruction (Annex  no.2). With these studies, we 
established numerous  techniques  for  histological, biochemical  and mechanical assessments of tendon and 
ligament healing.   
In our previous study, we found that cellular activities are changing in different healing stages
15
, and 
earlier application of biophysical intervention exhibited better effects to improve healing outcomes
18
. Natural 
healing process of tendon and ligament injuries involves four different stages: inflammation, cell recruitment, 
granulation and remodeling. Previous attempts to promote tendon and ligament healing mainly targeted on 
latter events such as enhancement of cell proliferation and matrix synthesis
23,26,31
; but modulation of earlier 
events,  especially  in  the  inflammatory  stage,  has  not  been  explored.  Anti-inflammatory  treatments  are 
commonly prescribed to tendon and ligament injuries to relieve symptoms; but its negative effects on tendon 
and ligament healing are now clear, since some pro-inflammatory mediators (i.e. prostaglandins) are crucial to 
trigger early healing events such as neo-vascularization
3
It is possible that optimization of these early 
healing events during the inflammatory stage of healing will be a more effective way to improve the 
healing  outcomes. During inflammatory stage of tendon and ligament healing, inflammatory cells are 
recruited to the injured sites to tackle with potential microbial infection and clear the damaged tissues. At this 
stage,  significant  oxidative  stress  prevails  and  neovascularization  occurs.  Neovascularization is  the  most 
important event in  this early  healing  stage  by bringing  healing cells, nutrients  and oxygen  for  the repair 
process. Since overwhelming oxidative stress is harmful to tendon cells
20
, reduction of oxidative stress by 
antioxidants such as  vitamin C (L-ascorbic acid) may exert protective effects. In  addition to its powerful 
antioxidant activity, vitamin C also exerted protection on vascular cells by modulation of nitric oxide synthase 
expression, enhancement of cell  growth, attachment and migration in vascular smooth muscles cell
32,13,37
Extremely low levels of ascorbate occur in patients and animals after trauma and infection, and early repletion 
requires  injection  of  supraphysiological  doses  of  ascorbate
19.28
 These  evidence  suggest  that  early 
supplementation of vitamin C may have beneficial effects for wound healing. A recent study reported that 
intraperitoneal injection of high dose vitamin C promote Achilles tendon healing as revealed by histological 
findings
7
. In a chicken model of flexor tendon repair, we found that a single bolus injection of vitamin C after 
surgical  repair  could  reduce  the  extent  of tendon  adhesion  and  hence  promote  functional  restoration. It 
suggests that local application of vitamin C at very early stages of healing (after surgical repair) can promote 
tendon  and  probably  ligament  healing,  since  oxidative  stress  and  neovascularization  are  important 
determinants for both tendon and ligament healing. As Vitamin C has a very high safety profile
24
, it gains the 
merits of high applicability for clinical use. Since surgical irrigation saline (sterile isotonic sodium chloride 
solution) is used for draining and cleansing during surgical operation, it may be the best carrier for vitamin C 
during  surgical operation.    In the present research project, we  propose to  develop  the use  of vitamin  C 
irrigation solution to promote tendon and ligament  healing. pre-clinical  trials  will be performed in  animal 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
ITSP 6.0
Page 5 of 25 
models with the advanced assessment methods we have established. 
1.2.    Any previously related project(s) undertaken by your organization and/or key project 
team members in the past five years and supported by the ITF or any other funding 
sources in Hong Kong and around the world?   If yes, please briefly describe the 
relevant/related project(s) and the source(s) of funding obtained for it (them). 
In  the  past  5  years,  our  project  team  members  have  received  4  grants  from General Research Fund 
(formerly competitive earmarked grant, Research Grant Committee) which are related to the present 
proposal (Annex no.1): 
1. 
Use of Bisphosphonate to Inhibit Local Bone Resorption and Improve Healing of Tendon Graft to Bone 
Tunnel. (PI: Prof. Lui PPY, duration: 2009-2011)
In this project, we established a rat model of ACL reconstruction with histological examination on decalcified 
samples of the graft incorporation and mechanical test for the ultimate loading of the reconstructed ACL. The 
temporal changes  of the healing outcomes were recorded. This information will be useful  for the present 
research project. 
2. 
Augmentation of Tendon Graft Healing within Bone Tunnel Using In-Situ Setting, Calcium Phosphate 
Bone Cement Complement with Autologous Mesenchymal Stem Cells (PI: Prof. Chan KM, duration: 
2007-2009)
In this project, we used a rabbit model of ACL reconstruction to investigate the effects of  stem  cells and 
biomaterials.  The  surgical  techniques  were  modified  for  the  establishment  of  the  rat  model  of  ACL 
reconstruction. 
3. 
The use of antioxidants to reduce tendon adhesion (PI: Prof. Hung LK, duration (2007-2009)
In this project, we evaluated the effect of peritendinous vitamin C/vitamin E injection (immediately after 
surgical repair) on the development of tendon adhesion. The results showed that vitamin C given as a single 
bolus injection can reduce the extent of tendon adhesion probably thorough its anti-oxidant effects. It inspired 
our  idea to develop  vitamin C irrigation solution  to  promote  tendon  and  ligament healing in the present 
proposal. 
4. 
An experimental study on the use of low intensity pulsed ultrasound to optimize patellar tendon healing 
in a rat model (PI: Prof. LK Hung, duration:2004-2007)
In this  project,  we  used  a  well-established  rat model  of  patellar tendon  injury to  evaluate  the  effect  of 
therapeutic ultrasound. We found that earlier biophysical intervention by LIPUS exhibited better effects to 
improve  healing  outcomes.  The  time  points  of  different  healing  stages  in  this  model  (inflammation, 
granulation and remodeling) were defined, which will be used as references for sampling time points in the 
present proposal. 
1.3.    Any other R&D work or projects similar to this application done or being carried out 
by  other parties in Hong Kong and around the world?    If yes,  please  set out the 
findings  and  explain  how  your  approach  is  compared  to  others  in  terms  of 
technological superiority, production costs, market acceptability, etc. 
To the best of our knowledge, we are the first group proposing the addition of Vitamin C in surgical 
irrigation solution. From a  search  in the  free  patent online (http://www.freepatentsonline.com/),  only two 
expired  and  one  current  items  related  to  surgical  irrigation  saline  was  found  (US4504493,  US4872865, 
US20060205657). Modifications of surgical irrigation saline have been proposed in other aspects, including 
addition of  antiseptics to  reduce  chance of infection
8
, detergents
25
and supplementation  of epinephrine  to 
reduce bleeding
30,34
. However, up-to-date there are no reports describing the feasibility of modified surgical 
irrigation solution to optimize tendon/ligament healing. 
 recent study reported intraperitoneal injection of  high dose vitamin may  promote Achilles tendon 
healing as revealed by histological findings
7
. Instead of systemic administration by intraperitoneal injection, 
we investigated the effect of peritendinous injection of vitamin C on tendon adhesion in a chicken model of 
flexor tendon repair
1
and positive results were reported
6
(Annex no.3). Due to the difficulty to keep injected 
vitamin C in peri-tendinous space, we propose to supplement vitamin C in irrigation solution in the present 
proposal. This will simplify the application procedure and circumvent the problem of leakage. In a pilot study 
we showed that irrigation of 5 ml vitamin C solution significantly increased neovascularization into tendon 
wound in the rat model of patellar tendon injury (Annex no.4, 5). It suggested that vitamin C supplementation 
may be an added value to surgical irrigation solution for a better healing outcome. 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
ITSP 6.0
Page 6 of 25 
With its safety profile 
24
, low cost and potential  beneficial effects to promote tendon and ligament 
injuries, vitamin C irrigation solution would have an advantage in terms of cost, technological feasibility and 
market acceptability, as compared to all commercially available surgical irrigation saline. It is foreseeable that 
extra intra-operative care will be achieved by this value-added surgical irrigation solution. 
1.4.    Any pilot work has already done by your organization and/or project team members 
in preparation for this project?    If yes, please describe the work done. 
Our team has established a full range of experimental techniques to evaluate the healing outcomes of tendon 
and ligament injuries in rat models: 
1.
Animal models 
A well-established rat model of patellar tendon injury will be used for evaluation of the effects of vitamin C 
irrigation solution on tendon injuries. We have published 12 papers (Annex 1)on this model and monitored the 
structural and functional restoration of the injured tendons up to 6 months post injury. The healing outcomes of 
patellar tendon injuries are evaluated by histology and mechanical tests as routine. For evaluation on ligament 
injuries,  we  have established  a rat  model  of  ACL reconstruction  with  characterization  on  histology  and 
mechanical properties of the graft. A conference abstract based on this model was accepted by International 
Symposium of tendon and Ligament X to be held on 5 Feb 2010. (Annex no.2) 
2.
Measurement  of  neovascularization  in  healing  patellar  tendon  by  High  resolution    3-D  Doppler 
ultrasound imaging 
We developed the use of high resolution ultrasound imaging to monitor tendon healing in rat patellar tendon 
injury (Annex no.6). The changes in wound size, tendon swelling and echo textures of the healing tendon were 
monitored  up to  day  42  post injury.   Since  the  extent of  neovascularization is  deterministic  for  healing 
outcomes, we also developed a quantitative measurement of vascularity in the tendon wound by 3-D Doppler 
ultrasound  imaging
12
(Annex  no.7).  These techniques  will  be  used to  evaluate  the effects  of  vitamin  C 
irrigation solution. 
3.
Animal gait analysis to measure painful response associated with tendon and ligament injuries   
We have developed the use of video-assisted gait analysis to monitor painful responses in a rat model with 
collagenase-induced  patellar  tendon  injuries.  We  found  that  the  injured  rats  exhibited  abnormal  gait 
parameters on both the injured limbs and the contralateral control limbs as compared to the control group with 
saline injection
(Annex no.8). Gait changes associated with pain could also be monitored in rat models of 
knee injuries, including ACL deficiency and traumatic patellar tendon injuries. As a result, video-assisted gait 
analysis will be employed to evaluate functional changes related to the healing outcomes of injured ACL or 
patellar tendons after supplementation of vitamin C in surgical irrigation solution. 
4.
Effects of Vitamin C injection on tendon adhesion in a chicken model of flexor tendon repair. 
On the potentials of vitamin C supplementation to optimize tendon healing, we have almost completed an 
Earmarked grant entitled 
the use of antioxidants to reduce tendon adhesion
. In a chicken model of flexor 
tendon repair, we established a new method to evaluate the severity of tendon adhesion (Annex no.10). We 
also found that local injection of vitamin C could reduce oxidative stress and reduce tendon adhesion, which 
was demonstrated as a decrease in gliding resistance and improved range of motion
6
(Annex no.3). Based on 
these findings, we propose that supplementation of vitamin C in surgical irrigation solution may be also be 
useful in other tendon and ligament injuries, and a pilot study was performed in a rat model of patellar tendon 
injury. 
5.
Effects of vitamin C irrigation solution on patellar tendon healing 
In a pilot study, we compared the effect of vitamin C irrigation saline (30 mg/mL) on tendon healing with 
normal saline as control. During the surgical procedure of induction of patellar tendon injury, either 5 ml of 
vitamin C saline or normal saline was used to cleanse the wound. The patellar tendons were washed before 
injury was induced, during the removal of central-one-third of the patellar tendon, and after the fascia was 
closed  by  sutures.  The  preliminary  data  showed  that  vitamin  C  irrigation  (n=6)  significantly  increased 
neovascularization in the tendon wound at day 4 post injury as compared to normal saline irrigation saline 
group (n=6) (Annex no.4 & 5). It suggests that vitamin C irrigation solution may have a positive effect on the 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
ITSP 6.0
Page 7 of 25 
healing outcomes of patellar tendon injury. 
1.5.    Any  request  for  funding  support  for  this  application  previously  rejected  by  ITF, 
Research  Grants  Council  (RGC)  and/or  other  Government-administered  funding 
schemes?    If yes, please set out the project reference of the previous application. 
No, this is a new project. 
1.6.    If this application is a previously rejected application under ITF, any major differences 
of this application vis-à-vis the previous one?   Please explain how these differences 
have addressed the previously raised concerns. 
Not applicable. 
1.7.    Any attempt made or being made to seek funding support for this project from other 
funding sources in Hong Kong and around the world (e.g. RGC, Applied Research 
Fund, Environment and Conservation Fund, etc.)?   Please advise any known results 
of the application(s). 
No. 
References: 
1.  Fu SC, Hung LK, Lee YW, Mok TY, Chan KM. (2010) A novel approach to measure tendon adhesion 
by video-assisted gliding test in a chicken model. J Hand Surg (Eur). (Accepted) 
2.  Lui PP, Lee YW, Mok TY, Cheuk YC, Fu SC, Ho G, Chan KM. (2010) The effect of alendronate on the 
mechanical strength of the tendon graft to bone tunnel complex after ACL reconstruction. ISL&T X 
2010 Hong Kong. 
3.  Chan KM, Fu SC. (2009) Anti-inflammatory management for tendon injuries – friends or foes? Sports 
Med Arthrosc Rehabil Ther Technol. 1:23. 
4.  Health Facts of Hong Kong 2009 Edition. (2009) Department of Health, Hong Kong SAR. 
5.  Fu  SC,  Chan  KM,  Chan LS,  Fong  DT,  Lui  PP.  (2009)  The use  of  motion  analysis  to measure 
pain-related  behaviour  in  a  rat  model  of  degenerative  tendon  injuries.  J  Neuosci  Methods. 
179(2):309-18. 
6.  Fu SC, Hung LK, Shum A, Lee YW, Mok TY, Lui PP, Chan KM. (2009) Local vitamin C injection 
reduced tendon adhesion in a chicken model of injured flexor digitorum  profundus tendon injury. 
ISL&T IX 2009 Las Vegas. 
7.  Ömeroğlu S,  Peker  T,  Türközkan N,  Ömeroğlu  H. (2009) High-dose  vitamin  C  supplementation 
accelerates the Achilles tendon healing in healthy rats. Arch Orthop Trauma Surg 129:281-286. 
8.  Owens  BD, White DW, Wenke JC (2009) Comparison  of irrigation  solutions and devices in a 
contaminated musculoskeletal wound survival model. J Bone Joint Surg Am 91:92-8. 
9.  Wen CY, Qin L, Lee KM, Chan KM. (2009) Peri-graft bone mass and connectivity as predictors for 
the strength of tendon-to-bone attachment after anterior cruciate ligament reconstructions. Bone. 
45(3):545-52. 
10.  Wen CY,  Qin L, Lee KM, Chan  KM. (2009) The use of  brushite calcium  phosphate cement  for 
enhancement of bone-tendon integration in an anterior cruciate ligament reconstruction rabbit model. 
J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 89B(2):466-74. 
11.  Wen  CY,  Qin  L,  Lee  KM,  Wong  MW,  Chan  KM.  (2009)  Influence  of  bone  adaptation  on 
tendon-to-bone healing  in bone tunnel  after  anterior  cruciate  ligament reconstruction  in  a  rabbit 
Appendix V ITF proposal on vitamin C irrigation solution
Documents you may be interested
Documents you may be interested