mvc view to pdf itextsharp : How to add text to pdf Library control component .net azure winforms mvc 9783540884149-c12-part1656

Microbial Transformation of Nitriles to High-Value Acids or Amides 
53
Fig. 5
Alicyclic mono-, di- and cyanocarboxylic acids and their amides prepared by the use of 
Rhodococcus rhodochrous IFO 15564 (R=CONH
2
, COOH) (1 – 12) and R. equi A4 (13 – 17)
NCH
2
C
CH
2
CONH
2
CH
2
CONH
2
R
COOH
CH
2
R
NC(CH
2
)
CH
2
CN
R
COOH
COOH
CN
COOH
CONH
2
CONH
2
CONH
2
CONH
2
CONH
2
CONH
2
CONH
2
CONH
2
COOCH
3
COOCH
3
COOH
COOH
OR
BzO
OBz
OH
OBz
OBz
OH
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(7)
(8)
(9)
(11)
(12)
(13)
(14)
(15)
(16)
(17)
CONH
2
(6)
(10)
Scheme 5
Enantioselective biotransformations of racemic trans-2-arylcyclopropanecarbonitriles 
by Rhodococcus sp. AJ270
CN
Ar
Ar
H
2
NCO
+
Ar
CO
2
H
Racemic nitrile                  (-) (1R, 2R)-amide         (+) (1S, 2S)-acid 
(R = C
6
H
5
, 4-FC
6
H
5
, 4-ClC
6
H
4
4-MeC
6
H
4
, 4-MeOC
6
H
4
)
How to add text to pdf - insert text into PDF content in C#.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
XDoc.PDF for .NET, providing C# demo code for inserting text to PDF file
adding text pdf files; acrobat add text to pdf
How to add text to pdf - VB.NET PDF insert text library: insert text into PDF content in vb.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Providing Demo Code for Adding and Inserting Text to PDF File Page in VB.NET Program
add text to a pdf document; how to insert text in pdf reader
54 
J. Chen et al.
and its analogs with para substituents, a methyl, chlorine and fluorine, led to good to 
excellent  enantioselectivity  of  the  corresponding  amides  and  acids,  especially  the 
amides.  Exceptionally,  comparatively  low  enantioselectivity  of  both  amides  and 
acids was detected in the reaction of 2-(4-methoxyphenyl)cyclopropanecarbonitrile, 
indicating that methoxy group caused a more dramatic effect than the above sterically 
smaller ones (Table 6). Moreover, (−)-(1R, 2R)-2-phenylcyclopropylmethylamine, a 
potential candidate for antihypertensive agent, could be provided by the reduction of 
(−)-(1R,  2R)-arylcyclopropanecarboxamide  (Scheme 6).  (+)-(1S,  2R)-2-
Phenylcyclopropylmethylamine, antidepressant tranylcypromine, was obtained from 
(+)-2-arylcyclopropanecarboxylic  acid  via  a  modified  Curtius  rearrangement 
(Scheme 7) [131].
In addition, a recombinant nitrilase AtNITI from A. thaliana bore the capability of 
regio- and stereoselective hydrolysis of 3-(2-cyanocyclohex-3-enyl)propenenitriles, 
which consisted of four isomers numbered A–D prepared by Diels-Alder reaction of 
1-cyano-1, 3-butadiene. Consequently, isomer D was exclusively hydrolyzed among 
the four dinitriles and thus (E)-cis-3-(2-cyanocyclohex-3-enyl)-propenoic acid was 
dominantly accumulated. Besides, isomer C was hydrolyzed to a small extent as well, 
Table 6
Bioconversions of 2-arylcyclopropanecarbonitriles  and its  analogs by Rhodococcus 
sp. AJ270
Ar
Time (h)
Amide (%)
Amide (e.e.)
Acid (%)
Acid (e.e. %)
C
6
H
5
0.5
37
78
37
73(81)
C
6
H
5
1
50
>99
39
55
C
6
H
5
3
25
>99
61
19
4-FC
6
H
4
2
44
89
48
75(91)
4-FC
6
H
4
5
33
>99
66
30
4-ClC
6
H
4
4
25
>99
43
52(78)
4-ClC
6
H
4
5.5
29
>99
62
41
4-MeC
6
H
4
2
46
70
32
75
4-MeC
6
H
4
5
32
>99
53
71(82)
4-MeOC
6
H
4
7
31
44
36
17
4-MeOC
6
H
4
10
39
21
41
12
Scheme 6
Reduction of (−)-(1R,2R)-2-phenylcyclopropanecarboxamide using LiAlH
4
Ph
LiAlH
4
H
2
NH
2
CO
Ph
H
2
N
Scheme 7
Preparation  of (+)-(1S,2R)-2-phenylcyclopropylmethylamine  by a  modified  Curtius 
rearrangement
Ph
COOH
1. ClCO
2
E
t/N
aN
3
Ph
NH
2
2. 
t
BuOH   3. HCl 
C# PDF insert image Library: insert images into PDF in C#.net, ASP
C#.NET PDF SDK - Add Image to PDF Page in C#.NET. How to Insert & Add Image, Picture or Logo on PDF Page Using C#.NET. Add Image to PDF Page Using C#.NET.
how to input text in a pdf; add text to pdf in acrobat
VB.NET PDF insert image library: insert images into PDF in vb.net
try with this sample VB.NET code to add an image As String = Program.RootPath + "\\" 1.pdf" Dim doc New PDFDocument(inputFilePath) ' Get a text manager from
how to add text fields to a pdf; add text pdf
Microbial Transformation of Nitriles to High-Value Acids or Amides 
55
which only occurred after complete conversion of D and when the enzyme concentration 
was high enough, while isomers A and B remained intact, in spite of higher enzyme 
concentration and prolonged conversion time. This outcome was considered to be 
explained  by three factors: on one hand, the  high regioselectivity, one the  other 
hand, the  high selectivity,  including both (E)-  and cis selectivity (Fig. 5) [132]. 
Similar discrimination between geometric isomers of substituted alicyclic nitriles was 
also accessed with the nitrile hydratase from R. equi A4. It was noted that trans-4-
benzoyloxycyclohexanecarbonitrile,  cis-3-benzoyloxy  cyclohexanecarbonitrile, 
trans-2-hydroxycyclohexanecarbonitrile and trans-2-hydroxycyclopentanecarbonitrile 
were converted to the equivalent amides. In contrast, cis-2-hydroxycyclohexanecarbon-
itrile and cis-2-hydroxycyclo-pentanecarbonitrile gave a majority recovery of them. 
Although cis-4-benzoyl-oxycyclohexanecarbonitrile was an acceptable substrate for 
the enzyme, the reaction proceeded at a rather low rate (Fig. 6) [133].
Moreover, an impressive example of the application of nitrile-amide converting 
enzymes was enzymatic synthesis of optically active 2-methyl- and 2,2-dimethyl-
cyclopropanecarboxylic acid and their derivatives. 2-Methyl- and 2,2-dimethylcy-
clopropanecarboxylic acid derivatives are key intermediates of curacin A, a potent 
antimitotic agent, and of cilastatin, a renal dehydropeptidase inhibitor commonly 
administered with penem and carbapenem antibiotics to prevent their degradation 
in  the kidney, respectively. In  the past,  no direct asymmetric  synthesis of  these 
compounds  has been  reported. Optically active 2-methylcyclopropanecarboxylic 
acid and its amide derivatives have been prepared from the optical resolution or 
through the multistep transformations. Recently, nitrile-hydratase-associated ami-
dases  participated  in  the  synthesis  of  optically  active  acids [110].  S-(+)-2,2-
Fig. 6
Regioselective hydrolysis of 3-(2-cyanocyclohex-3-enyl)-propenenitriles by a recombinant 
nitrilase AtNITI from A. thaliana
CN
CN
Diels-Alder
reaction
CN
CN
+
CN
CN
CN
CN
+
CN
CN
+
a
b
c
d
CN
CO
2
H
CO
2
H
+
CN
Nitrilase
(E)-cis-7
H
VB.NET PDF Password Library: add, remove, edit PDF file password
VB: Add Password to PDF with Permission Settings Applied. This VB.NET example shows how to add PDF file password with access permission setting.
how to add text to pdf file with reader; how to insert text into a pdf with acrobat
C# PDF Password Library: add, remove, edit PDF file password in C#
C# Sample Code: Add Password to PDF with Permission Settings Applied in C#.NET. This example shows how to add PDF file password with access permission setting.
adding text to a pdf file; how to insert text box in pdf file
56 
J. Chen et al.
Dimethylcyclo-propanecarboxamide has been obtained from kinetic resolution of 
racemic  2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide  employing  amidase-containing 
microbes or the amidases, which was a process adopted  in Lonza for  industrial 
operation. The above preparation involved in amidases exhibiting R-enantioselective. 
However, Comamonas acidovorans A18 was the only strain reported abroad, con-
taining R-enantioselective amidase and has gained success in kinetic resolution of 
the  racemic  mixture [134].  Recently,  D.  tsuruhatensis  ZJB-05174,  capable  of 
R-enantioselective degradation of 2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide, was isolated 
employing a newly established colorimetric screening method. This isolate may be a 
suitable candidate for the production of (S)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide 
from its racemic form after optimization of culture and biotransformation conditions 
(Scheme 8[89].
5.1.6  Enantioselective Hydrolysis of Racemic Nitriles and Amides
Enantioselective Hydrolysis of Racemic Nitriles by Nitrile Hydratase
Although  a  significant  number  of  nitrilases  and  amidases  exhibited  different 
degrees of enantioselectivity, nitrile hydratases were previously assumed to be rela-
tively  non-stereospecific.  However,  later  on  reports  concerning  enantioselective 
hydration of a-arylpropionitriles appeared. Unfortunately, an extreme paucity of 
nitrile hydratases exhibited enantioselectivity that gave rise to products with the ee 
value higher than 75%. Pseudomonas putida NRRL 18668, a soil derived Gram-
negative bacterium, contained a nitrile hydratase capable of stereoselective hydrol-
ysis of 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutyronitrile with more than 90% enantiomeric 
excess (ee) to the (S)-amide, which appeared to be the first description of a sterose-
lective nitrile hydratase from a Gram-negative organism. This strain is also capable 
of a two-step hydrolysis of 2-(4-isobutylphenyl)-propionitrile and 2-(6-methoxy-2-
napthyl)-propionitrile to the (S)-acids (ibuprofen and naproxen respectively) with 
stereoselectivity residing primarily in the aliphatic amidase [135]. Subsequently, 
another Gram-negative isolate Agrobacterium tumefaciens d3 appeared harboring 
enantioselective  nitrile  hydratase, which hydrated racemic  2-phenylpropionitrile, 
2-phenylbutyronitrile, 2-(4-chlorophenyl)propionitrile, 2-(4-methoxy)propionitrile 
or ketoprofen nitrile, and the corresponding (S)-amides were formed with the high-
est enantiomeric excesses (ee >90% until about 30% of the respective substrates 
were converted) [136].
Scheme  8
Preparation  of  (S)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide  by  (R)-enantioselective 
amidase in D. tsuruhatensis ZJB-05174
CONH
2
CONH
2
COOH
+
R-enantioselective amidase
VB.NET PDF Text Extract Library: extract text content from PDF
With this advanced PDF Add-On, developers are able to extract target text content from source PDF document and save extracted text to other file formats
add text field to pdf; add text boxes to pdf
C# PDF Text Extract Library: extract text content from PDF file in
How to C#: Extract Text Content from PDF File. Add necessary references: RasterEdge.Imaging.Basic.dll. RasterEdge.Imaging.Basic.Codec.dll.
adding text fields to pdf acrobat; how to insert text in pdf file
Microbial Transformation of Nitriles to High-Value Acids or Amides 
57
Former studies showed that in the nitrile hydratase-amidase system enantiomeric 
discrimination occured during amide hydrolysis. As an exception, Rhodococcus sp. 
270, known as a nitrile hydratase and amidase containing organism, was effective 
for converting (R)-2-phenyl- butyronitrile to the corresponding amide with an ee 
value of 83%, suggesting that the amidase turned to be inactive for the amide and 
the formation of the chiral amide was due to the R-enantioselectivity of the nitrile 
hydratase [137].
In general, nitrile hydratase are  coupled with amidase in organisms,  and in 
most cases, formations of optically pure amides and acids are owing to the higher 
enantioselectivity of amidase compared with that of nitrile hydratase. A number 
of amides and acids were obtained via this method, for example, enzymatic syn-
thesis of (S)-naproxen by Rhodococcus sp. C3II and Rhodococcus erythropolis 
MP50. From racemic naproxen nitrile, Rhodococcus sp. C3II formed S-naproxen 
amide and subsequently S-naproxen. Racemic naproxen amide was hydrolysed to 
S-naproxen. Rhodococcus sp. MP50 converted racemic naproxen nitrile predomi-
nantly to R-naproxen amide and racemic naproxen amide to S-naproxen.  With 
both strains racemic naproxen amide was converted to S-naproxen with an enan-
tiomeric  excess >99% at a conversion rate up to 80% of the theoretical value 
(Scheme 9[138]. By the hydrolysis of (R, S)-isopropyl-4¢-chlorophenylacetonitrile 
using  cells  of  Pseudomonas  sp.  B21C9,  enantiopure  (S)-2-isopropyl-4¢-
chlorophenylacetic  acid,  an  intermediate  of  pyrethrins  could  be  obtained.  It 
appeared that the process proceeded via stepwise reactions by a nitrile hydratase 
exhibiting  poor  (S)-selectivity  and  an  amidase  exhibiting  strict  (S)-selectivity 
(Scheme 10). Heating resulted in the racemization of (R)-amide, which in turn 
caused enhanced yield of (S)-acid [139].
It was also described in China that Rhodococcus sp. AJ270 could be utilized for 
the preparation of enantiopure carboxylic acids and derivatives via stereoselective 
hydrolysis of a series of racemic a-substituted phenylacetonitriles and amides. The 
overall enantioselectivity of the process is mainly determined by the combination 
of selectivities of nitrile hydratase and amidase, with the latter being a major con-
tributor, which was consistent with the above findings. Enantioselective synthesis 
Scheme 9
Preparation of S-naproxen by Rhodococcus sp. C3II and R. erythropolis MP50
S-enantioselective amidase
MeO
COOH
(S)-naproxen
+
MeO
CONH
2
CONH
2
MeO
CN
Nonenantioselective nitrile hydratase
Rhodoccus sp. C311
Rhodoccus erythropolis MP50
MeO
VB.NET PDF Text Add Library: add, delete, edit PDF text in vb.net
How to VB.NET: Add Text to PDF Page. Add necessary references: This is a piece of VB.NET demo code to add text annotation to PDF page.
how to add text to pdf file; how to add a text box in a pdf file
C# PDF Text Add Library: add, delete, edit PDF text in C#.net, ASP
A best PDF annotation SDK control for Visual Studio .NET can help to add text to PDF document using C#. C#.NET Demo Code: Add Text to PDF Page in C#.NET.
add text fields to pdf; how to add text to a pdf in acrobat
58 
J. Chen et al.
of  optically  active  2-methyl-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylic  acids  (see 
Sect. 5.1.5) and chiral cyclopropane compounds were successfully performed by 
the same strain (see Sect. 5.1.5). Very recently, it was observed that Rhodococcus 
sp. AJ270 are able to catalyze the hydrolysis of oxiranecarbonitrile to synthesize 
Scheme 11
Biotransformations of racemic trans-2,3-epoxy-3-arylpropanenitriles by Rhodococcus 
sp. AJ270
O
CN
Ar
O
CO
2
H
Ar
R
O
CONH
2
Ar
R
S
+
trans-racemic nitrile
2R, 3S-amide
2S, 3R-acid 
(Ar=C
6
H
4
, 4F-C
6
H
4
, 4Cl-C
6
H
4
, 3-Cl-C
6
H
4
, 4-Br-C
6
H
4
, 2-Me-C
6
H
4
, 3, 4-OCH
2
OC
6
H
3
)
Scheme 12
Biotransformations of racemic trans-3-aryl-2-methyloxiranecarbonitrile by 
Rhodococcus sp. AJ270
O
CONH
2
Ar
S
R
Me
O
CO
2
H
Ar
Me
+
O
CN
Ar
Me
low enantioselective 
nitrile hydratase
O
CONH
2
Ar
Me
2S, 3R-enantioselective 
amidase
trans-racemic nitrile
racemic amide
2R, 3S-amide
2S, 3R-acid
(Ar = C
6
H
4
, 4F-C
6
H
4
, 4Cl-C
6
H
4
, 3-Cl-C
6
H
4
, 4-Br-C
6
H
4
, 2-Me-C
6
H
4
, 3, 4-OCH
2
OC
6
H
3
)
Scheme  10
Preparation  of  (S)-2-isopropyl-4′-chlorophenylacetic  acid  by  Pseudomonas  sp 
B21C9
Cl
CN
Nitrile hydratase with poor (S)-selectivity
Cl
CONH
2
Amidase with strict (S)-selectivity
Cl
CONH
2
Cl
COOH
+
VB.NET PDF Text Box Edit Library: add, delete, update PDF text box
VB.NET PDF - Add Text Box to PDF Page in VB.NET. Add Annotation – Add Text Box Overview. Adding text box is another way to add text to PDF page.
add text box in pdf document; how to input text in a pdf
Microbial Transformation of Nitriles to High-Value Acids or Amides 
59
optically active 2R,3S-3-aryloxiranecarboxamides (Scheme 11[140] and 2R,3S-3-
aryl-2-methyloxiranecarboxamides (Scheme 12[141]. As a useful microorganism, 
Rhodococcus sp. AJ270 is also able to rapidly catalyze enantioselective hydrolysis 
of racemic 1,4-benzodioxane-2-carbonitrile under  very mild conditions, yielding 
2S-1,4-benzodioxane-2-carboxamide and 2R-1,4-benzodioxane-2-carboxylic  acid 
in high yields with excellent enantioselectivity, which are very important entities in 
medicinal chemistry for they are chiral building blocks in the design and synthesis 
of chiral therapeutic agents (Scheme 13) [142].
Enantioselective Hydrolysis of Racemic Nitriles by Nitrilase
The previously  limited  evidence for stereoselective nitrilases  has been extended 
recently [143, 144] and their functions have been widely applied in the manufacture 
of various optically active carboxylic acids.
Amino acids are widely used as building blocks for the pharmaceutical industry, 
feed additives and  human nutrition. Nitrilase participated manufacture of amino 
acids represents an attractive approach. In previous studies, formation of l-amino 
acids from a-aminonitriles was achieved using alginate immobilized Acinetobacter 
sp. APN containing nitrilase [145]. Later on, several optically active amino acids 
were produced from a-aminonitriles by R. rhodochrous PA-34 [146].
An intelligent screening method gave access to enantioselective nitrilases that 
are  highly  adapted  to  the  production  of  high-value  hydroxyl  carboxylic  acid 
derivatives, such as (R)-(−)-mandelic acid, which was described as a key interme-
diate  of  semi-synthetic  cephalosporins  and  penillins, a  chiral  resolving  agent, 
chiral  synthon  for  the  synthesis  of  anti-tumor  agents  and  anti-obesity  agents. 
Three  isolates  including  P.  putida,  Microbacterium  paraoxydans  and 
Microbacterium liquefaciens gave rise to the desired product, (R)-(−)-mandelic 
acid. In terms of growth rate, enzyme activity, enantioselectivity and thermosta-
bility, P. putida was more suitable compared to the other two organisms. Thus it 
was selected for further use [95].
Noticeably, Alcaligenes faecalis ATCC 8750 was famous for the effective hydrol-
ysis of mandelonitrile to (R)-(−)-mandelic acid. Interestingly, enantiomeric excess of 
(R)-(−)-mandelic acid formed from mandelonitrile was 100% and the yield attained 
was approximately 91%. Spontaneous racemization of S-mandelonitrile because of 
the chemical equilibrium accounted for the high yield. The observation was inconsistent 
Scheme 13
Enantioselective biotransformations of racemic 1, 4-benzodioxane-2-carbonitrile by 
Rhodococcus sp. AJ270
O
O
CN
O
O
CONH
2
+
O
O
COOH
racemic nitrile
S-(-)-amide
R-(+)-acid
60 
J. Chen et al.
with other enantioselective bioprocess where the yield attained was 50% at most. 
Later studies successfully completed the purification and characterization of the nitrilase, 
meanwhile, immobilization of the nitrilase (Scheme 14[147, 148]. In particular, the 
immobilized nitrilase is useful for the production of hydroxy analogues of methionine 
derivatives that could have an interest in cattle feeding and in the transformation of 
compounds bearing other acid- or base-sensitive groups [149].
Researchers in China conducted the nitrilase-mediated manufacture of (R)-(−)-
mandelic acid as well. He et al. screened a microbial strain identified as Alcaligenes 
sp.  ECU0401  harboring  a  stereoselective  nitrilase  for  the  kinetic  resolution  of 
racemic mandelonitrile to (R)-(−)-mandelic acid  with an enantiomeric excess of 
>99.9% [150]. Aiming at obtaining microorganisms with high enzyme activity and 
excellent selectivity, our lab has been undertaking bioconversion of (R)-(−)-mandelic 
acid  and have  made much  progress. This convenient and practical  approach  to 
producing  (R)-(−)-mandelic acid  was  developed into  commercial application  by 
Mitsubishi Rayon [151].
As mentioned earlier, optically active 2-arylpropionic acids like (S)-naproxen, 
(S)-ibuprofen and (S)-ketoprofen could be produced from the respective 2-arylpro-
pionitrile  by  the  aid  of  the  sequential  action  of  nitrile  hydratase  and  amidase, 
besides, these acids could also be procured via (S)-enantioselective nitrilases. It was 
evident  that  interaction  of  racemic  2-(4′-isobutylphenyl)  propionitrile  with 
Acinetobacter sp. strain AK226 yielded S-(+)-2-(4′-Isobutylphenyl) propionic acid 
(S-(+)-ibuprofen) with a 95% enantiomeric excess (Scheme 15). The observation 
that R-enantiomer of the nitrile was inert to the organism and no detection of the 
Scheme 14
Preparation of (R)-(−)-mandelic acid by A. faecallis ATCC 8750
1496
1497
1498
CN
Nitrilase
OH
OH
CN
+
H
OH
H
COOH
(R,S)-mandelonitrile
(S)-(+)mandelonitrile
(R) -(−)-mandelic acid
CHO
+
HCN
Alkaline pH
Microbial Transformation of Nitriles to High-Value Acids or Amides 
61
amide  throughout  the reaction  suggested  Acinetobacter  sp. strain AK226 was a 
highly enantioselective nitrilase possessing bacterium [152]. Moreover, nitrilase in 
R. rhodochrous ATCC 21197 also appeared to be able to convert racemic 2-arylpro-
pionitrile to optically active 2-arylpropionic acids. (S)-Naproxen could be obtained 
by this organism and excellent enantioselectivity could be achieved at the cost of 
conversion (Scheme 16[153].
Enantioselective Hydrolysis of Racemic Amides by Amidase
Amidases with enantioselectivity are universal and these amidases catalyzed reac-
tions  offered  optically  pure  compounds  of  pharmaceutical  importance  such  as 
amino acids or 2-arylpropionic acids. Thus, they have attracted substantial interest 
and much progress has been made. A typical example of an enantioselective ami-
dase catalyzed industrial biotransformation is the enzymatic chiral resolution of (R, 
S)-2,2-dimethylcyclopropane carboxamide providing the optically pure S-isomer. 
The  process  was  developed  by  Lonza  AG  (see  Sect.  5.1.5)  (Lonza  AG,  CH). 
Similarly,  using an  R-enantioselective amidase  producer,  D. tsuruhatensis ZJB-
05174, to produce (S)-2,2-dimethylcyclopropane carboxamide was investigated in 
our lab (See Sect. 5.1.5). The route, furthermore, is under progressive development 
and its potential of industrial application has been developed by Hisun Pharmaceutical 
Co., Ltd (Zhejiang).
As previously exemplified, efficient kinetic resolution of racemic piperazine-
2-carboxamide  and  racemic  piperidine-2-carboxamide  to  the  corresponding 
enantiomerically pure  carboxylic  acids by the  aid  of  whole cells of  wild-type 
microorganisms harboring stereospecific amidases. The attained acids, (S)- and 
(R)-piperazine-2-carboxylic acid, and (S)-piperidine-2-carboxylic acid belong to 
non-proteinogenic amino acids and are used as precursors of numerous bio-active 
Scheme 15
Production of S-(+)-ibuprofen by (S)-enantioselective nitrilase in Acinetobacter sp. 
strain AK226
CN
(S)-enantioselective nitrilase
CN
+
CN
Scheme 16
Production of (S)-naproxen by (S)-enantioselective nitrilase in R. rhodochrous 
ATCC 21197
CN
(S)-enantioselective nitrilase
COOH
62 
J. Chen et al.
compounds. Due to the value of (S)-piperazine-2-carboxylic acid, which can be 
used for the synthesis of  the  HIV protease inhibitor Crixivan, its  biosynthesis 
route employing Klebsiella terrigena DSM 9174 was developed into commercial 
application by Lonza AG [154] (Fig. 7).
Besides, amidase often coexists with the nitrile hydratase and formation of opti-
cally active acids is always ascribed to the combination of the poor selectivity of 
nitrile hydratase and excellent selectivity of amidase, which was discussed above 
(see “Enantioselective Hydrolysis of Racemic Nitriles by Nitrile Hydratase” above). 
As described above, in spite of the various applicability of the amidase, their appli-
cation on a large or commercial scale has remained unexplored.
5.1.7  Regioselective Biotransformation of Di- and Trinitriles
It is rather difficult to conduct regioselective hydrolysis of dinitriles by chemical 
methods  in  a  single  step.  An  enzymatic  approach,  however,  offers  significant 
advantages since ammonium cyanocarboxylates from dinitriles could be obtained 
in nearly quantitative yields in one step. Acidovorax facilis 72W that possessed a 
regioselective nitrilase was successfully utilized for the conversion of an aliphatic 
a,w-dinitrile  to an  ammonium salt  of  w-cyanocarboxylic  acid,  which  was  then 
directly converted to the corresponding lactam by hydrogenation, without detection 
of the  intermediate w-cyanocarboxylic acid or  w-aminocarboxylic acid (Scheme 
17[155]. The process could also be achieved by the action of a combined nitrile 
hydratase and amidase present in Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D, where an 
CONH
2
CONH
2
Klebsiella terrigena
DSM 9174
Burkholderia sp.
DSM 9925
H
N
N
H
H
N
N
H
H
N
N
H
COOH
COOH
N
H
Pseudomonas fluorescens
DSM 9924
N
H
COOH
(S)-enantioselective amidase
(R)-enantioselective amidase
(S)-enantioselective amidase
(S)
(S)
(R)
Fig.  7
Preparation  of  chiral non-proteinogenic  amino  acids by enantioselective  hydrolysis  of 
racemic amides
Documents you may be interested
Documents you may be interested