pdf viewer c# winform : Add picture to pdf application Library cloud windows asp.net .net class parrishfull2-part2235

4. Human Embryonic Stem Cells
* Does the proposed project involve human embryonic stem cells?
If the proposed project involves human embryonic stem cells, list below the registration number of the 
specific cell line(s) from the following list: http://stemcells.nih.gov/research/registry/. Or, if a specific  
stem cell line cannot be referenced at this time, please check the box indicating that one from the 
registry will be used: 
Specific stem cell line cannot be referenced at this time.  One from the registry will be used.
PHS 398 Cover Page Supplement
Yes
No
Cell Line(s):
          
      !" #$!
  
   
Clinical Trial & HESC                                                                                         Page 24
Principal Investigator/Program Director (Last, first, middle): Parrish, Colin, R.
Add picture to pdf - insert images into PDF in C#.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Sample C# code to add image, picture, logo or digital photo into PDF document page using PDF page editor control
how to add a photo to a pdf document; adding a jpeg to a pdf
Add picture to pdf - VB.NET PDF insert image library: insert images into PDF in vb.net, ASP.NET, MVC, Ajax, WinForms, WPF
Guide VB.NET Programmers How to Add Images in PDF Document
add jpg to pdf acrobat; how to add image to pdf acrobat
C# TIFF: How to Insert & Burn Picture/Image into TIFF Document
Support adding image or picture to an existing or new new REImage(@"c:\ logo.png"); // add the image powerful & profession imaging controls, PDF document, tiff
add jpg to pdf online; add signature image to pdf
VB.NET Image: Image Cropping SDK to Cut Out Image, Picture and
VB.NET image cropper control SDK; VB.NET image cropping method to crop picture / photo; you can adjust the size of created cropped image file, add antique effect
add image pdf acrobat; adding image to pdf form
VB.NET TIFF: How to Draw Picture & Write Text on TIFF Document in
drawing As RaterEdgeDrawing = New RaterEdgeDrawing() drawing.Picture = "RasterEdge" drawing provide powerful & profession imaging controls, PDF document, tiff
add image pdf document; how to add image to pdf document
VB.NET Image: VB.NET Codes to Add Antique Effect to Image with .
mature technology to replace a picture's original colors add the glow and noise, and add a little powerful & profession imaging controls, PDF document, image
add jpg to pdf; how to add image to pdf form
VB.NET Image: Image Scaling SDK to Scale Picture / Photo
Framework application; VB.NET sample code for how to scale image / picture; Frequently asked questions about RasterEdge VB.NET image scaling control SDK add-on.
add picture to pdf; add picture to pdf reader
VB.NET Image: Create Code 11 Barcode on Picture & Document Using
file, apart from above mentioned .NET core imaging SDK and .NET barcode creator add-on, you also need to buy .NET PDF document editor add-on, namely, RasterEdge
add an image to a pdf; add photo to pdf file
C# Word - Paragraph Processing in C#.NET
Add references: C# users can set paragraph properties and create content such as run, footnote, endnote and picture in a paragraph.
adding images to a pdf document; how to add image to pdf file
VB.NET Image: Image Resizer Control SDK to Resize Picture & Photo
NET Method to Resize Image & Picture. Here we this VB.NET image resizer control add-on, can provide powerful & profession imaging controls, PDF document, image
add image pdf; how to add a picture to a pdf file
PHS 398 Research Plan
1. Application Type:
From SF 424 (R&R) Cover Page. The response provided on that page, regarding the type of application being submitted, is repeated for your 
reference, as you attach the appropriate sections of the Research Plan.
*Type of Application:
OMB Number: 0925-0001 
2. Specific Aims
3. *Research Strategy
6. Protection of Human Subjects
7. Inclusion of Women and Minorities
8. Targeted/Planned Enrollment Table
9. Inclusion of Children
10. Vertebrate Animals
13. Consortium/Contractual Arrangements
14. Letters of Support
15. Resource Sharing Plan(s)
16. Appendix
1. Introduction to Application 
(for RESUBMISSION or REVISION only)
Human Subjects Sections
2. Research Plan Attachments: 
Please attach applicable sections of the research plan, below.
Other Research Plan Sections
5. Progress Report Publication List
11. Select Agent Research
12. Multiple PD/PI Leadership Plan
4. Inclusion Enrollment Report
New
Resubmission
Renewal
Continuation
Revision
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1245-SpecAimfnl.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1246-ResStratfnl.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1247-VERTANIMn.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1248-CONSORTARn.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1249-CollabLETS.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
1250-ResSHAREn.pdf
Add Attachment
Delete Attachment
View Attachment
Add Attachments
Remove Attachments
View Attachments
          
      !" #$!
  
   
List of Research Plan Attachments                                                                             Page 30
Principal Investigator/Program Director (Last, first, middle): Parrish, Colin, R.
Capsid structures, variation and flexibility
.
This project brings together the skills of laboratories at Cornell 
University and at Pennsylvania State University Medical Center to provide a detailed understanding of the roles 
of structural variation and flexibility in the parvoviral capsid, and their effects on receptor and antibody binding 
and the controls of cell infection and host range.  These are fundamental problems that apply to all animal 
viruses, where the capsid must protect the genome in the environment, interact with host molecules including 
cell receptors and antibodies, and undergo a series of regulated structural transitions during cell entry to 
eventually release the genome for replication. Viral capsid binding to host receptors and antibodies can have 
varying and often unpredictable effects on infection, and those interactions also control many other replication 
steps.  Where these virus-host interactions are specific they can control the viral host ranges.   
A model for understanding virus cell infection and host range control through differential receptor 
binding.
We study two viruses that differ in host range due to 3 or 4 capsid protein mutations that control 
specific receptor binding.  Canine parvovirus (CPV) arose around 1976 as a variant of feline panleukopenia 
virus (FPV), and caused a pandemic of disease during 1978 and 1979.  That virus has continued to circulate 
worldwide as a serious canine pathogen, and has also evolved new antigenic, receptor binding, and host range 
variants.  FPV and CPV both can bind the feline transferrin receptor 1 (TfR) to infect cat cells, and CPV gained 
the host range for dogs by gaining the ability to bind the canine TfR.  This new binding property was associated 
with increased flexibility of 2 or 3 of the surface loops in the capsid that allowed CPV to accommodate a glycan 
on the canine TfR binding domain.  Flexibility in the capsid is controlled by variation in hydrogen bonds, by 
cleavages of the VP2, and by ion binding. Later steps in infection also involve changes in the capsid structure 
that release the viral DNA or protein domains of VP2 and VP1. These viruses are targeted by antibodies that 
can differ in their binding sites and in their ability to neutralize the virus.  We will examine a set of antibodies 
that detect specific capsid structures, examining the effects of antibodies on TfR binding, and seeking to 
understand the mechanisms of neutralization. 
Aim 1. 
To define the structural variation in parvovirus capsids, and to determine the effects on capsid 
functions and DNA release.
Hypothesis:  That the capsids of parvoviruses undergo structural variation that is 
important for infection.  That occurs through the binding or release of divalent ions, by site-specific proteolysis, 
or by variation in specific intra- or inter-chain bonds. 
a)   Further define the structural flexibility in the capsid through analysis of the structures and to identify 
sources of variation using specific peptide and protease analysis. 
b)  Determine the functions of specific capsid structures by preparing mutants with altered inter-chain bonds, 
divalent ion binding sites, or protease cleavage sites. 
c)  Compare the functions of capsid structures in mutant or naturally variant viruses to reveal the structures 
and interactions that are critical for capsid stability, TfR binding, and the processes of cell infection. 
Aim 2.
To define the structural interactions between various parvovirus capsids and variants of the 
transferrin receptor or artificial receptors.
Hypothesis: That specific binding of capsids to the feline or 
canine TfRs is required for successful cell infection, and those interactions are controlled by viral structures 
varying in structure and flexibility.
a)  Determine the interactions of the feline and canine TfRs with different parvovirus capsids, examining 
cryoEM structures of receptor-capsid complexes at moderately high resolution.  By correlating residues on 
the capsid and TfR that affect binding, identify the interacting structures.   
b)  Identify functional sites on the capsids by selecting for mutants of CPV or FPV by growth on TfRs with 
mutant binding domains, or on receptors with artificial binding ligands. 
c)   Prepare capsids with insertions that bind alternative cell receptors, and test for cell infection. 
d)  Examine how flexibility of capsid loops controls interactions with different host TfR - in particular receptors 
with additional glycans within the attachment face of the receptor. 
Aim 3. 
Use antibodies to probe the capsid structure, and also to determine how binding to overlapping 
sites leads to variable neutralization.
Hypothesis: That antibodies can be used to detect variant structures 
in the viral capsid, and that the specific position and orientation of binding controls the likelihood of competition 
with the TfR, and neutralization of infection.
a)  Examine antibodies with known capsid binding sites for their effects on TfR binding, including the effects of 
cleavage with proteinases or after other asymmetrically or symmetrically displayed modifications. 
b)  Determine the effects on viral functions of antibody variants engineered with increased binding affinities.  
Identify sites on the virus that do not bind antibodies but that bind TfR, for example those subunits with 
cleavages in surface loops. 
Specific Aims                                                                                                 Page 31
Principal Investigator/Program Director (Last, first, middle): Parrish, Colin, R.
A) SIGNIFICANCE.  
A1) Importance: understanding fundamental aspects of virus infection processes controlled by
receptor or antibody binding, and the controls of viral host ranges.
The parvoviruses include many 
different human and animal pathogens, including the long-known B19 virus which causes the childhood fifth 
disease and more severe diseases of adults, as well as the recently identified human bocavirus and Parv4.  
The adeno-associated viruses (AAVs) are parvoviruses that are not associated with disease, but are being 
developed as human gene therapy vectors and the same issues of receptor and antibody recognition are 
important for vector optimization. The viruses we are studying in this model are the canine parvovirus (CPV) 
and its close relative feline panleukopenia virus (FPV), which bind to the host transferrin receptor type-1 (TfR) 
to infect cells (53). The parvoviruses have a 25 nm diameter T=1 capsid that is assembled from 60 copies of 
two or three versions of a single capsid protein, and the single stranded DNA of the virus is packaged into the 
pre-formed capsid by the action of the larger non-structural protein (NS1).  Although those capsids are 
remarkably robust and survive in the environment, structural variation results in viruses with different 
properties, and those also show structural changes during the process of cell entry and nuclear trafficking.  The 
simple and well defined structures of the parvovirus capsids, the known properties of the TfR, and the well 
characterized antibodies available for these studies allow us to examine several processes of viral infection.   
Variant viruses with extended host ranges can cause new outbreaks or epidemics of infectious disease.  The 
viruses that we are examining include the comparison of such a system, where one variant arose as a 
pandemic pathogen in a new host through the acquisition of mutations in the capsid protein that altered its 
structure to change host-specific receptor binding, and also to change its antigenic structure. 
A2) Critical barriers: to antiviral therapy and vaccination success.
Animal viruses are complex biological 
machines that engage host cell receptors and undergo a series of varying structural and functional changes to 
allow cell penetration and release of the genome for replication.  Those infection processes are key to the 
success of any virus, and are targets of various anti-viral drugs.  A better understanding of the details of the 
general processes involved will likely allow the development of more effective and broadly acting antiviral 
drugs.  Although antibodies are critical components of immune responses of all vertebrates, in many cases 
they are poorly effective so that viruses maintain persistent infections or vaccines do not work well.  
Understanding the underlying rules that determine how antibodies bind to viruses and block the processes of 
cell infection will reveal how effective antibody responses might be elicited against different viruses. 
A3) Improvement of scientific knowledge: understanding fundamental viral mechanisms and clarifying 
textbook knowledge of virus structures and functions.
This project addresses several mechanisms 
important for all viruses of humans and other animals.  In general terms those include understanding viral 
recognition of cell receptors, how changes in receptor binding sites lead to alterations of binding and host 
range, capsid and receptor structures and the interactions that control uptake and trafficking within cells.  
During each of these steps the viral proteins must assume the correct conformations, bind receptors with the 
correct contacts, and in the process undergo a variety of structural transitions to release internal peptides, 
protein domains, and the viral DNA.  Here we will investigate the roles of flexible and variable structures in the 
parvovirus capsid and show how receptor and antibody binding control cell infection.   
B) INNOVATION.
This is an unusually complete model for understanding virus structures and functions involved in cell infection 
and host range control, as there are few other viruses where the ancestors and descendents of a host-
switching virus that caused a pandemic of disease in its new host are available for analysis.  The laboratories 
presenting this proposal are the only ones working with this model in any detail, but we have been able to 
explain many aspects of the process, from the evolutionary processes allowing emergence, to the identification 
of specific receptor binding as a key step that lead to the extended host range of the virus [reviewed (52)].  
There are several fundamental issues being investigated in these studies, including being able to obtain a 
detailed understanding of the variation and dynamic properties of viral proteins, how those structural changes 
control receptor attachment and cell infection, and that analysis is complemented by studies of antibody 
binding and its effects on receptor binding and infection.  By analysis of naturally variant or mutant viruses, 
receptors, and antibodies we will gain a better understanding of the functional properties of the capsid-ligand 
structures and alterations in binding properties.  We use a variety of advanced methods and structural, 
biophysical, biochemical and functional assays in these studies. While many of the methods we propose are 
being used in viral studies (including by our laboratory), the proposed studies include combinations of those 
methods that are being used in novel ways to gain a complete understating of the mechanisms involved.  
Research Strategy                                                                                             Page 32
Principal Investigator/Program Director (Last, first, middle): Parrish, Colin, R.
C) APPROACH.
The three related and overlapping specific aims are directed at understanding: (1) the roles of structural 
variation and flexibility in controlling capsid functions; (2) the interactions of viral capsid structures with different 
receptors, and the mechanisms that lead to infection; and (3) the antibody binding to capsids and resulting 
competition with receptors and mechanisms of neutralization 
C1) Aim 1. 
To define the structural variation in parvovirus capsids, and to determine the effects on 
capsid functions and DNA release.
Here we seek to further define the structural variation of the capsid, 
including sources of asymmetry.  In these studies (and also in those of Aims 2 and 3) we also define the 
effects of those changes on the functions of the virus, in particular its interactions with receptors or antibodies.   
C1a) Background – brief summary of literature and preliminary results.
C1a1) Functional variation and flexibility of parvoviral protein structures.
The structures of parvovirus 
capsids vary between different viruses, and in our previous work we have shown that small changes control 
significant variation in the viral properties including receptor binding, host range, and antigenicity [some recent 
examples are: (19, 21, 22, 24, 26, 31, 45, 46, 49)].  Among the functional flexible or variable structures seen 
are loops with varying numbers of intra-chain and inter-chain bonds, loops which bind or release 2 or 3 divalent 
ions, the possible formation or disruption of disulfide bonds, protease cleavage of a proportion of the proteins, 
or opening and closing of cylindrical pores at the fivefold axes which allow VP2 N-termini and the viral DNA 5’-
termini to pass to the outside of the capsid (14, 15).   
In the studies proposed, we are using information derived from many different parvoviruses and adeno-
associated virus studies, and while space does not allow a review of that literature, those include studies of 
structural variability and flexibility in the capsids that occur under various conditions, including at low pH, ion 
removal, after host cell, receptor, or antibody selection, ubiquitin modification, or after binding to sphingolipids 
or receptors [a small number of the relevant references are:  (13, 16, 30, 34, 36, 38, 41, 47, 48, 56, 61, 65, 
66)].   
C1a2) The roles of structural variability and flexibility in viral proteins.
Functional variation in structure is 
a key property of many virion proteins, with well recognized triggers for conformational change including low 
pH, ion binding or release, receptor binding, or protease cleavage, although other more subtle and less well 
understood changes are also likely to be common.  The changes resulting often allow membrane penetration 
and/or fusion, or the complete or partial disassembly of the virion to expose internal components and to allow 
viral trafficking and genome release for replication.  As examples, structural changes in the gp120 of HIV are 
induced upon CD4 binding, allowing binding of CCR5 or CXCR4 co-receptors that mediate infection (59).  The 
binding of receptors to the picornavirus capsid can result in structural changes (7, 55), and antibodies binding 
to the flavivirus E glycoprotein can trap intermediate conformational forms of the protein (29, 39).  In addition, 
variation in viral protein structures can result in antibodies binding to forms that differ from those seen by the 
receptors, allowing evasion of at least part of the antibody response [e.g. (10)].  Submolar cleavages, 
asymmetric structures such as portals, or incorporation of minor proteins into virions may be common in viral 
proteins but are often hard to define in detail and therefore not well understood.  Here we seek to define the 
functional connections between the variation in the parvovirus structure, including submolar variation, and its 
functional significance for virus receptor and antibody binding and the infectious cycle. 
C1a3) Asymmetry of functional sites in viral structures.
Some of the flexible structures in parvoviral 
capsids are asymmetric, being present in only a small proportion of the capsid subunits.  Examples include 
those resulting from cleavage of surface or internal loops of a small number of the VP1 and VP2, the inclusion 
of 5-6 VP1 molecules per capsid, or the packaging of one ssDNA molecule with its 5’-end protruding from the 
capsid (13, 15).  These types of asymmetrically variant structures are likely present in the capsids of many 
different types of viruses, but can be difficult to detect without specific probes, and would not be seen after X-
ray or cryoEM analysis of viral capsids that involve symmetry averaging for the reconstructions. 
The VP2 within the capsid can be cleaved at several positions.  The cleavage of VP2 to VP3 occurs only in full 
capsids, and occurs between residues 15 and 24 depending on the specificity of the proteinase, and must 
involve exchange of cleaved and uncleaved N-termini through the fivefold axis pores of the capsid (15, 45). 
That VP2 to VP3 digestion is temperature dependent, most likely because the pores (and perhaps other parts 
of the capsid) have to expand to allow exchange of N-termini (15, 45).  Divalent ions bound within the capsid 
are associated with changes in the flexibility of several surface loops, including those involved in binding to 
sialic acids (60).   
Research Strategy                                                                                             Page 33
Principal Investigator/Program Director (Last, first, middle): Parrish, Colin, R.
Documents you may be interested
Documents you may be interested